组织学

1．取材 颈椎脱臼法处死小鼠，打开腹腔，剪取肝组织（或其他组织）。 切取的组织块不宜太大，以利于固定剂穿透，通常以5mm×5mm×2mm或10 mm×10 mm×2 mm为宜。取下所需要的肝组织，切成一小块2－3mm厚。 注意事项： （1）取材动作要迅速，不宜拖太久，以免组织细胞的成分、结构等发生变化。 （2）切片材料应根据需要观察的部位进行选择，尽可能不要 …

在病毒包装过程中，如果观察到细胞大量死亡，是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素： 病毒滴度：尽管细胞大量死亡，仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高，可以继续收集病毒用于后续实验。 污染：细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染，收集病毒可能不是一个好主意，因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …

理想的电镜包埋剂(electron microscopic embedding media) 应具有以下性质：黏度低，易透入，聚合均匀，聚合后体积收缩小，能耐受电子轰击，高温下不变形，对细胞成分提取少，精细结构保存良好，在电镜的高倍放大下，不呈现可见结构，有良好的切割性能，有适当的反差，对人体无害等。但实际上，现在所用的各种包埋剂都各有利弊。 包埋剂的种类很 …

免疫共沉淀：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整的细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间结合的保持下来。 免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术，其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)，若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白，就可以形成这样一种复合物：“ …

荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光，但有几点需要注意： 细胞存活率：冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好，具有正常的形态和活力。 荧光稳定性：荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件：使用适当的冻存保护剂（如DMSO）并在-80°C或液氮中冻存，以尽量减 …

一、实验原理： 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉 …

1. 包埋剂的配制 (1) 配方Ⅰ : 环氧树脂618 10 ml 十二烷基琥珀酸酐（DDSA) （硬化剂） 5 ml 甲基内次甲基二甲酸酐(nadic methyl anhydride, MNA) （硬化剂） 8 ml 苯二甲酸二丁酯（DBP) （增塑剂） 3 ml 2, 4, 6-三（二甲氨基苯酚） （ DMP-30) （加速剂） 0. 2 ml (2) …

在亲和层析纯化抗体后，通常需要添加稳定剂以保护抗体免受降解。常见的稳定剂包括甘油、糖类（如蔗糖或海藻糖）、以及醇类（如乙醇）。添加这些稳定剂的目的是增加抗体的稳定性，特别是在长期保存或反复冻融过程中。以下是常用稳定剂的添加浓度建议： 1. 甘油 (Glycerol) 甘油常用于抗体溶液的冷冻保存，以防止冰晶形成和蛋白质变性。推荐添加浓度为： 最终浓度：10- …

免疫组化实验结果的判定和分析，就实验结果而言，免疫组化技术主要涉及抗体实验结果的描述与分析、图片的确定与选取、相关数据的提供。 免疫组化结果的判定原则： ⒈必须同时设对照染色。没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的。 ⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应定位在细胞膜上；CK应定位在细胞浆内；PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内；EMA应定位在细胞膜上等等。 …

石蜡包埋法是组织学制片中最常用的方法、石蜡(paraffin)是由石油中分离出来的一种甲烷， 系固体碳化氢， 呈蜡样半透明的结晶块状。切片用石蜡应选优质的品种， 要纯而透明， 并有适当黏性。根据熔点的不同，有软蜡和硬蜡之分，软蜡的熔点为52~56°C ，硬蜡为60~62°C 。在室温高时用硬蜡，室温低时用软蜡；薄切片宜用硬蜡， 厚切片宜用软蜡。新蜡内含气体， …