组织学

一、免疫组织化学简介 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体 …

理想的电镜包埋剂(electron microscopic embedding media) 应具有以下性质：黏度低，易透入，聚合均匀，聚合后体积收缩小，能耐受电子轰击，高温下不变形，对细胞成分提取少，精细结构保存良好，在电镜的高倍放大下，不呈现可见结构，有良好的切割性能，有适当的反差，对人体无害等。但实际上，现在所用的各种包埋剂都各有利弊。 包埋剂的种类很 …

1、免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些？ 实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可 …

石蜡包埋法是组织学制片中最常用的方法、石蜡(paraffin)是由石油中分离出来的一种甲烷， 系固体碳化氢， 呈蜡样半透明的结晶块状。切片用石蜡应选优质的品种， 要纯而透明， 并有适当黏性。根据熔点的不同，有软蜡和硬蜡之分，软蜡的熔点为52~56°C ，硬蜡为60~62°C 。在室温高时用硬蜡，室温低时用软蜡；薄切片宜用硬蜡， 厚切片宜用软蜡。新蜡内含气体， …

免疫共沉淀：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整的细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间结合的保持下来。 免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术，其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)，若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白，就可以形成这样一种复合物：“ …

流式细胞术(flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。 流式细胞术目前已广泛地被应用于免疫学基础研究和逐步进入临床应用各方面，用流式细胞仪对细胞表面的抗原成分进行标记分析，可区别多种细胞的特性，为细胞免疫的研究增加了有效的手段和帮助。 流式细胞术最大的特点是能在保持 …

一 、原理： IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A“特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。 二、实验最需要注意点 1 …

组织化学中的组织切片主要有石蜡切片法、冰冻切片法和振动切片法等。石蜡切片法比较节省时间，操作容易，可切极薄的组织片(4 μm 以下，通常为6~10μm 厚的切片），能做连续切片，且组织块可包埋在石蜡中永久保存。但石蜡切片只能用于较小的组织块，不适用于大的组织块。石蜡切片法能改变组织内的化学反应，甚至使可显示的酶和其他物质（如脂类）完全丢失，或使蛋白质变性、酶 …

冰冻切片法是组织化学，特别是酶组织化学最常用的切片技术，固定或未固定的组织样品均可进行冰冻切片，新鲜组织冰冻切片对组织细胞内酶类保存最佳，尤其对热、酸、碱、有机溶剂等耐受能力弱的酶和化学物质更加适用。冰冻切片也是免疫细胞化学研究中常用的切片方法，能够较完好地保存多种抗原，尤其是表面抗原的抗原性。 在冰冻切片中，组织中水分易形成冰晶，往往影响酶和抗原的定位。一 …

一、实验原理： 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉 …