2026年 5 月 4日, 星期一
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组织学

亲和层析纯化抗体,请问纯化后收集到的抗体溶液,加甘油或者醇类,糖类的话,浓度一般是加多少

在亲和层析纯化抗体后,通常需要添加稳定剂以保护抗体免受降解。常见的稳定剂包括甘油、糖类(如蔗糖或海藻糖)、以及醇类(如乙醇)。添加这些稳定剂的目的是增加抗体的稳定性,特别是在长期保存或反复冻融过程中。以下是常用稳定剂的添加浓度建议: 1. 甘油 (Glycerol) 甘油常用于抗体溶液的冷冻保存,以防止冰晶形成和蛋白质变性。推荐添加浓度为: 最终浓度:10- …

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免疫共沉淀实验原理及注意事项

一 、原理: IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A“特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。 二、实验最需要注意点 1 …

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慢病毒感染,胶体金测出来很高,可感染效果很差的原因

慢病毒感染效率低,尽管用胶体金测试显示滴度很高,可能有以下几个原因: 病毒颗粒质量:虽然胶体金检测显示病毒滴度很高,但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损,无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异:胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量,但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒(感染性单位)可能比实际检测的数量要低 …

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电镜包埋剂应该具备哪些特征?

理想的电镜包埋剂(electron microscopic embedding media) 应具有以下性质:黏度低,易透入,聚合均匀,聚合后体积收缩小,能耐受电子轰击,高温下不变形,对细胞成分提取少,精细结构保存良好,在电镜的高倍放大下,不呈现可见结构,有良好的切割性能,有适当的反差,对人体无害等。但实际上,现在所用的各种包埋剂都各有利弊。 包埋剂的种类很 …

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荧光表达的细胞在冻存后72小时后再测荧光情况,可以吗?

荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光,但有几点需要注意: 细胞存活率:冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好,具有正常的形态和活力。 荧光稳定性:荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件:使用适当的冻存保护剂(如DMSO)并在-80°C或液氮中冻存,以尽量减 …

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冰冻切片法详细步骤

冰冻切片法是组织化学,特别是酶组织化学最常用的切片技术,固定或未固定的组织样品均可进行冰冻切片,新鲜组织冰冻切片对组织细胞内酶类保存最佳,尤其对热、酸、碱、有机溶剂等耐受能力弱的酶和化学物质更加适用。冰冻切片也是免疫细胞化学研究中常用的切片方法,能够较完好地保存多种抗原,尤其是表面抗原的抗原性。 在冰冻切片中,组织中水分易形成冰晶,往往影响酶和抗原的定位。一 …

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免疫组化实验结果的判定原则和分析标准

免疫组化实验结果的判定和分析,就实验结果而言,免疫组化技术主要涉及抗体实验结果的描述与分析、图片的确定与选取、相关数据的提供。 免疫组化结果的判定原则: ⒈必须同时设对照染色。没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的。 ⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应定位在细胞膜上;CK应定位在细胞浆内;PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内;EMA应定位在细胞膜上等等。 …

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如何制作石蜡切片(H.E.对染法)?

一、实验原理: 石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉 …

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