2024年 11 月 4日, 星期一
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慢病毒感染后72小时,效率低,细胞已经长满,有什么办法补救?

在慢病毒感染后72小时感染效率较低、细胞已经长满的情况下,可以尝试以下几个措施来提高感染效率并优化实验条件:

  1. 细胞传代或重新播种:如果细胞已经长满(汇合度较高),可能会影响慢病毒的感染效率。可以将细胞进行传代,重新播种在新的培养板上,使其达到较低的汇合度(例如30-50%),然后再进行感染。
  2. 优化感染时的MOI(Multiplicity of Infection):MOI是病毒颗粒与细胞的比例。如果感染效率低,可能需要增加病毒的浓度或调整病毒量,尝试不同的MOI来优化感染效果。
  3. 使用转染试剂或助感染剂:某些转染试剂或助感染剂(如Polybrene或HITC)能够帮助提高慢病毒感染效率。可以尝试在感染过程中加入适量的Polybrene(一般浓度在4-8 µg/mL之间),以增强病毒进入细胞的能力。
  4. 延长感染时间:如果72小时感染效率低,可能考虑延长感染时间,观察96小时或更长时间的感染效果。
  5. 优化培养条件:确保培养条件(如温度、CO₂浓度、培养基等)适合慢病毒感染。细胞健康状态对于感染效率至关重要,因此保持良好的培养条件非常重要。
  6. 检查病毒活性:如果多次感染效率低,可能需要检查慢病毒的滴度或质量。病毒长期存放或反复冻融可能会影响病毒的活性,可以制备新鲜的病毒或增加病毒量。
  7. 重复感染:如果一次感染效率低,可以尝试多次感染,每次感染间隔24小时,以提高总体感染效率。

通过这些步骤,可以提高慢病毒的感染效率并优化实验结果。

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