2022年 8月 20日, 星期六
新闻

使用AUfOMACS 系统进行辅助细胞的自动分选

材料

  • 小鼠
  • HBSS 洗涤缓冲液
  • MACS 缓冲液
  • CD90 (Thyl. 2) 磁珠
  • RPMI-10 完全培养基
  • autoMACS 系统和分选柱
  • 30μm 尼龙网或40μm 预分离滤膜

步骤

  1. 用2 只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞 。
  2. 将细胞在10ml HBSS 洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数 。
  3. 将细胞悬液在4°C,200g 离心10min。弃上清后将沉淀按每108 个细胞0.9ml MACS 缓冲液的比例混悬。每108 个细胞加入0. 1ml CD90 (Thyl. 2) 磁珠后在4℃孵育15min 。
  4. 除了选择depletes 程序(非passel 程序),其他操作按(用AUTOMACS 系统进行总T 细胞、CD4+细胞或CD8+ T细胞的自动分离)方案中的步骤4~7 进行,这样辅助细胞将从阴性通道洗脱。

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