2024年 7月 20日, 星期六
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蛋白质的保存方法如何选择?

保存方法的选择取决于几个因素,包括蛋白质内在的稳定性、所需的保存时间的长短和对于防止破坏所要求的程度。这些因素有很大的变异性,但是,在大多数情况下都应当遵守以下常规的准则。

如果仅仅是要将小批量的纯化蛋白质保存约几天的时间,那么通常只要以非冷冻的溶液形式4°C保存即可,如果需要保存较长的时间,或如果有明显的蛋白质降解(如可见的沉淀物或不可接受的功能损失),那么就应当选择冷冻保存或以盐析沉淀物的形式保存。这两种方法都比较简单,而且如果操作得当的话,能够保持几周至几个月的保存稳定性。在设计一种盐析策略之后,应当先进行冻融预实验,以确定某种给定的蛋白质制剂对这种应激的耐受性,如果在这种处理期间蛋白质稳定,那么用冷冻的方式进行长期保存将有可能提供适当的稳定性。然而,如果预实验表明蛋白质对这种剧烈的冻融应激敏感的话,则必须试验适当的冷冻保护剂,或尝试应用蛋白质盐析,后者可能更容易些,不需要花很大的气力来优化冻融耐受性,在这一点上,所用方法的选择取决千对蛋白质先前的经验,以及某个实验室成功处理蛋白质保存
稳定性问题的历史。最后,只有当所有的其他方法失败了或当需要在室温保存很长的时间(如18~24 个月)时,才尝试冻干。

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