2022年 1月 28日, 星期五
新闻

石蜡切片的操作要点

组织化学中的组织切片主要有石蜡切片法、冰冻切片法和振动切片法等。
石蜡切片法比较节省时间,操作容易,可切极薄的组织片(4 μm 以下,通常为6~10μm 厚的切片),能做连续切片,且组织块可包埋在石蜡中永久保存。但石蜡切片只能用于较小的组织块,不适用于大的组织块。石蜡切片法能改变组织内的化学反应,甚至使可显示的酶和其他物质(如脂类)完全丢失,或使蛋白质变性、酶失活等。因此,在有条件时可采用冰冻干燥法或冰冻替代法,使组织块在低温下脱水干燥,以保存其化学成分或酶活性。
石蜡切片的操作要点如下:
(1) 切片刀或一次性切片刀片必须锋利无凹痕。
(2) 载玻片必须清洗洁净。
(3) 将切片刀或刀片安装在持刀座上(以15°为宜),不切片时应将刀锁紧,以免受伤。
(4) 将蜡块固定于支持器上,并调整蜡块和刀刃至适当位置(刀刃与蜡块表面呈5 °夹角)。
(5) 细心移动刀座或蜡块支持器,使蜡块与刀刃接触,旋紧刀座和蜡块支持器。
(6) 用右手匀速旋转切片机轮,修切蜡块表面至包埋其中的组织块完整
暴露。
(7) 调节切片厚度调节器(一般为4~6μm) ,切出的蜡片应连续成带,完
整无缺,厚度均匀,无刀痕、颤痕、皱折、开裂、缺损、松解等。
(8) 以专用小摄子轻轻夹取蜡片,放入伸展器的温水中( 45°C 左右) ,使切片全面展开。注意水温必须适宜,水面必须洁净。
(9) 将蜡片附贴千涂有蛋白甘油或经3-氨丙基-三乙氧基硅烧(3-aminopropyltriethoxy silane, APES) 等贴片剂处理过的载玻片上,蜡片与载玻片之间应无气泡。
(10) 将贴附了蜡片的载玻片置千烤箱中烘烤(60~62°C, 30~60 min) ,然
后即可进行染色。

推荐

石蜡包埋法如何选择石蜡?

石蜡包埋法是组织学制片中最常用 …

发表评论

您的电子邮箱地址不会被公开。 必填项已用*标注