Western-Blot中BSA,脱脂蛋白的作用是什么?

经常有人做Western-Blot会疑惑:为什么做蛋白实验,应该把杂蛋白去除才对,会担心其他蛋白的加入会影响实验结果,增加背景。但为什么偏偏会用加入BSA,脱脂蛋白的方法减少背景呢?

这需要从Western-Blot的原理说起,Western-Blot中电泳转膜后让蛋白分布NC膜或PVDF膜上,但膜上还有很多地方是空白的,这些空白的地方如果不被封闭,很可能就会与抗体结合,这样的非特异结合会造成背景的增加,同时,这些蛋白的引入,由于抗原抗体结合的特异性,所以不会造成背景的增加。

所以,封闭对Western-blot实验是至关重要的。至于为什么要用脱脂奶粉,而不用全脂奶粉,欢迎大家来回答。

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