DNA分离前你应该知道的那些事

DNA 是相当稳定的。这也是保存和传递遗传信息所必须具备的但是不能因此而太随意，DNA的污染来源主要是其他DNA 。

DNA 分离

• 分离的DNA可以是基因组的也可以是染色体组外的。
• 研究DNA 分离试剂盒，这些试剂盒可以是针对基因组的和染色体组外的DNA、从琼脂糖凝胶中分离DNA或者从PCR产物中抽提DNA。他们利用一些结合DNA的树脂或者滤膜，通常是一些小的离心柱，可以避免酚抽提和CsCI 超离心。
• 染色体组外的DNA作为噬菌体或质粒DNA抽提出来。
• 大片断的DNA, 比如说基因组DNA必须小心操作，以防止断裂，其抽提和储存不同于小片断DNA 。
• DNA 制备可分为小量、中量和大量制备， 小量制备就可以满足大多数的使用要求。
• DNA的质量鉴定是需要的。有些过程比如DNA测序或者转染哺乳动物细胞需要高质量的DNA , 而其他操作如限制性图谱筛选克隆，对DNA 的质量要求不十分严格。

测定的单位

1 kb DNA = 6. 5 x 10⁵ Da 的双链DNA （钠盐）

1 kb DNA = 3.3 x 10⁵Da 的单链DNA （钠盐）

1 kb DNA = 3.4 x 10⁵Da 的单链RNA （钠盐）

1 kb DNA = 37000Da = 333 个编码氨基酸

1 个脱氧核糖核昔酸碱基的平均分子量＝ 324.5 Da

1 个脱氧核糖核昔酸碱基对的平均分子量·= 649 Da

1 μg/ml 的1 kb DNA = 3.08 nmol/L 5‘端

1 μg/ml 的DNA= 3. 08 μmol/L 磷酸盐

表 1 基因组DNA

物种	碱基对／单倍体基因组	单拷贝基因的拷贝数量
大肠杆菌	4.7X 106bp	1.8X108
果蝇	1.4X 108bp	6.6 X 105
小鼠	2.7X 109bp	3.4 X 105
人	3.3X 109bp	2.8 X 105