关于细胞培养基你需要知道的那些事

大多数实验室购买的培养基是预先处理好的瓶装液体培养基,或者是干粉状的需要水化和过滤除菌的培养基,后者比较便宜,用量大时更有价值。

由于培养基中都有酚红或其他染料pH 指示剂,虽然外观看上去都差不多,但事实上它们并不一样,所以千万不能用错。

添加有酚红pH指示剂的培养基的颜色

pH6.5 以下为拧檬黄

pH6.5 为黄色

pH7.0 为橙色

pH7.4 为红色

pH7.6 为粉红

pH7.8 为紫色

大多数细胞的最适pH 为7.4 左右。

微黄色的培养基为酸性,说明:

(1)细胞过量生长;  (2)细菌污染;   (3)培养箱中仅为浓度过高

紫色的培养基为碱性,说明:

(1)细胞生长极为缓慢,甚至没长;   (2)霉菌污染;   (3)培养箱中CO2的浓度过低

有些细胞需要在培养基中配制时添加其他成分,L -谷氨酰胺是最常见的补充剂,会很快被用尽。这些添加物可以现配后过滤除菌再加入培养基内,也可溶解后使用那些分装好的储存溶液。

细胞培养基中有许多热不稳定的成分,必须低温保存,但是培养基在接触细胞以前必须要事先预热到37℃,千万不要把冷的培养基加入细胞内。由于培养基中的许多成分对热不稳定,比如一些抗生素在37’C 时的半衰期很短,所以千万不能把培养基一直放在37’C, 最好只在使用培养基的10 分钟前再预热,用多少培养基,就取出多少预热。

最好买500 ml 瓶装的培养基或在500 ml 的瓶内配制培养基。如果你一周使用500 ml 培养基,使用前一次加入血清和其他不稳定的试剂。但要注意先吸出适量的培养基,使得在加入其他成分后最终的体积还是500 ml 。(如果要加入10 %的血清和5 ml 抗生素,那么用试剂瓶配好445 ml 的培养基后再加入血清和分装好的抗生素。)

推荐

活细胞的显微计数方法及步骤

将细胞样品与台盼蓝染料混合。活 …

发表评论

您的电子邮箱地址不会被公开。 必填项已用*标注