英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染外源核酸不整合到宿主染色体中，在短时间内在基因或蛋白水平产生较高的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。稳定转染是相对需要建立某些基因整合到染色体DNA的细胞系来说的，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B 磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选， …
阅读更多 »细胞转染应该什么时候加抗生素？
动物体内转染需要哪些条件？
1.每次动物实验，需要准备什么东西，器材？ ①转染的核酸，如siRNA，miRNA，mimic、inhibitor，也可以转染DNA。 ②转染试剂和动物。 ③进行注射的器材。 2.可以转染的核酸都有什么？细胞实验的核酸可以用吗？ 可以转染小片断RNA如siRNA，miRNA，mimic、inhibitor，也可以转染DNA。进行体外细胞实验的核酸就可以。但要 …
阅读更多 »为什么脂质体转染试剂细胞毒性大？
细胞生物学的战友，应该对细胞转染不陌生，没做过也见别人做过。有个问题想跟大家讨论一下，就是脂质体毒性的问题。我们都知道做一次细胞转染不容易，从准备细胞到目的细胞筛选，过程相当繁琐。所以如何提高转染效率成为了关键，但是常用的脂质体转染要求无血清转染，而且有很大的细胞毒性，对转染效率和实验结果都会产生影响，那为什么脂质体转染试剂毒性这么大？ 已有众多的文献报道， …
阅读更多 »动物实验系列篇章之二——实验动物的编号和分组
一、编号 实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多，根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。 (一)挂牌法：将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上，将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。 (二)打号法：用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打 …
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