英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
向哺乳动物细胞内转染反义寡核苷酸从而抑制miRNA 功能的具体方法参照本方案。通过检测miRNA 靶蛋白水平或携带miRNA 靶基因的3’端非翻译区( 3UTR ) 报道基因的活性来检测ASO 对于miRNA 的效应。本方案主要针对24 孔板设计，如果用其他多孔板、细胞瓶或不同直径培养皿培养细胞，需根据孔／瓶表面积计算细胞密度和试剂体积 试剂 A …
阅读更多 »Journal of Cell Science | 中山大学生命科学院报道：治疗肌营养不良症的新发现
该团队在《Journal of Cell Science》期刊上发表了题为“HMGB2 regulates satellite cell-mediated skeletal muscle regeneration via IGF2BP2”的论文。文章通过体内转染试剂（EntransterTM -in vivo, Engreen）获取的数据突出了 …
阅读更多 »Real-time qPCR实验设计—-从开始到结束
实验设计其实比实验本身更重要！！好的实验设计可以事半功倍，节省时间节省时间！！尤其做生物实验，一定要查询尽可能完全的相关资料，整理好思路，设计好实验路线。当然实验过程中出现各种各样的变化，但有足够多的背景知识，就可以分析原因，才有可能创新。 一、 对于一个real-time qPCR而言，首先就是实验材料的处理和料；然后引物设计，这步至关重要，好的引物是实验 …
阅读更多 »在果蝇S2细胞中通过反义寡核苷酸抑制miRNA 功能
本方案描述了将ASO 转入果蝇S2 细胞以便抑制miRNA 功能的方法。通过检测miRNA靶蛋白水平或miRNA 靶基因3UTR 报道基因的活性，可以检测ASO 对miRNA 的效应。本方案是针对24 孔板设计的，若用其他多孔板、培养瓶或不同直径培养皿，应根据其表面积计算细胞密度和试剂体积 。 试剂 ASO （ 12.5μmol/L ) 和错配和/或无关对照 …
阅读更多 »小RNA 的Northern 杂交分析
该方案描述如何运用Northern 杂交检测15~150 个核昔酸的小RNA （图1) 。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离总RNA, 再采用半干法进行转膜。RNA 通过紫外线照射交联至尼龙膜上，在Church 缓冲液中对RNA 和α-32p标记的寡核昔酸探针进行杂交，并用磷酸成像分析技术(phosphorimager analysis) 进行检测分析。使用包含两个 …
阅读更多 »Cell Death & Disease | 南京医科大学孙秀兰教授团队报道：缺血性中风的新型治疗策略
孙秀兰教授团队在《Cell Death & Disease》期刊上发表的“Neuronal extracellular vesicle derived miR-98 prevents salvageable neurons from microglial phagocytosis in acute ischemic stroke”文章揭 …
阅读更多 »Oxidative Medicine and Cellular Longevity | 天津医科大学余剑波教授团队报道：保护肺损伤的新见解
余剑波教授团队在《Oxidative Medicine and Cellular Longevity》期刊发表了题为“Hydromorphone Protects against CO2 Pneumoperitoneum-Induced Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondri …
阅读更多 »Am J Cancer Res | 北京大学附属医院报道：软骨肉瘤治疗研究新进展
该团队在《Am J Cancer Res》期刊发表了题为“BMPR2-pSMAD1/5 signaling pathway regulates RUNX2 expression and impacts the progression of dedifferentiated chondrosarcoma”的研究论文。论文实验使用了RNA体内 …
阅读更多 »Journal of Cellular Physiology | 西北工业大学生命科学院报道：治疗骨质疏松症新机制
该团队在《Journal of Cellular Physiology 》期刊上发表了题为“A novel long noncoding RNA AK016739 inhibits osteoblast differentiation and bone formation”论文。文章通过RNA体内转染（EntransterTM-in vivo, …
阅读更多 »RNAi、miRNA及siRNA的区别和联系
RNA干扰 （RNAi）：近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。 MicroRNA（miRNA,微RNA）： …
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