首先siRNA由于只 …
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
IL-37基因位于人类第二号染色体上,共有五种不同的剪切亚型,即IL-37a ~e,其中IL-37b 是五种亚型中分子量最大的一个 。IL-37 具有广泛的炎症抑制作用,可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ,另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »免疫共沉淀:当细胞在 …
阅读更多 »IL-37基因位于人类第二号染色体上,共有五种不同的剪切亚型,即IL-37a ~e,其中IL-37b 是五种亚型中分子量最大的一个 。IL-37 具有广泛的炎症抑制作用,可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ,另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »脱氧核糖核酸酶I(DNaseI)是38 kDa糖蛋白的非限制性核酸酶。它可以水解单链和双链DNA中的磷酸二酯键。内源性DNA酶I是促进细胞凋亡过程中染色质分解的核酸内切酶之一。作为分泌型内切酶,DNaseⅠ是体液中主要的核酸酶,如血清和尿液。在人类中,胰腺是DNASi I的合成和分泌的主要来源,占血清中D …
阅读更多 »转染效率重复性差原因: 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。 细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 血清质量不稳定。用同一批号的血清。
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
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