测序正确是一个重要的验证步骤,但它不能完全说明shRNA构建没有问题。下面我会具体说明为什么。 测序正确说明了什么? shRNA序列(包括发夹结构、目标序列)与设计一致: 如果你对构建后的质粒进行了Sanger测序,序列结果和你设计的shRNA完全一致,这说明你的克隆步骤(连接、转化等)是成功的。这意味着你至少在DNA水平上构建了正确的序列结构。 但这并不代 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与mir-136诱导骨髓细胞分化研究
免疫细胞谱系规范和功能受祖源和环境因素的影响。免疫细胞,如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子细胞在炎症环境中分化的机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染(Entranster)与mir-136诱导骨髓细胞分化研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内外RNA转染(Entranster)与sirtuin3和肾缺血再灌注损伤研究
缺血再灌注(I/R)可引起急性肾损伤,其特征是增加活性氧(ROS)和线粒体损伤,并破坏肾小管上皮细胞的细胞极性、细胞骨架完整性和细胞基质和细胞-细胞相互作用。线粒体蛋白sirtuin 3(SIRT3)可能有助于减轻或预防I/R损伤。SIRT3过表达有助于恢复急性肾损伤模型中线粒体的动态变化。但关于SIRT3是否能够及如何减轻I/R引起的急性肾 …
阅读更多 »siRNA细胞转染应注意的事项
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染,需要加大核酸或者转染试剂的剂量吗?这个和做2个质粒共转染有什么区别?
进行2个不同基因的siRNA共转染时,确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量,但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量: 当你进行siRNA共转染时,转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说,一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多,因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内,只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »RNA转染与骨形态发生蛋白-2调控PMVECs的肌源性分化研究
肝功能不全和肝硬化影响多种器官系统的脉管系统,导致器官功能受损,导致发病率和死亡率增加。肝肺综合征(HPS)是一种发生在肝硬化晚期的肺微血管疾病,加重原发性肝脏疾病,并引起多种相关并发症。由于HPS在全球范围内受到越来越多的关注,在过去几十年中,HPS的病理研究取得了进展。然而,HPS的病理生理机制尚未确定。 …
阅读更多 »tRF-Gln-CTG-026改善肝损伤机制重大发现(影响因子:IF 40+)
文献标题:《tRF-Gln-CTG-026 ameliorates liver injury by alleviating global protein synthesis》, 期刊名称:Signal Transduction and Targeted Therapy 影响因子:40+ DOI:https://doi.org/10.1038/s41392-0 …
阅读更多 »RNA转染与非连接蛋白Cx32在宫颈癌细胞中作用的研究
缝隙连接蛋白(Cx)构成脊椎动物的缝隙连接(GJ),可调节重要的细胞过程,包括电耦合,增殖,分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致,GJ和CX被公认为肿瘤抑制;恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中,转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡(有毒的“旁观者效应”)。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究
黑色素瘤是增长最快的恶性肿瘤,因此是一种最危险的皮肤癌类型。MiRNA(miR)‑128,这是一个公认的抑制肿瘤生长的因子,可参与树突状细胞抗肿瘤作用,然而,mir-128与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫功能仍待澄清。现分享一篇mirRNA转染(Entranster)与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染研究
如今,人类胚胎干细胞中小干扰RNA(siRNA)或质粒DNA(pDNA)低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染的文献,以供参考。
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