肝肺综合征(HPS)以肺内血管扩张(IPVD)引起的动脉氧合缺陷为特征。肺血管重塑(PVR)是IPVD的一个重要病理特征,然而,有关该过程的内在机制的细节尚不明确。现分享一篇RNA转染(Entranster)与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与B细胞成熟抗原和多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态 …
阅读更多 »siRNA转染实验的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »测序正确是不是说明shRNA构建没有问题
测序正确是一个重要的验证步骤,但它不能完全说明shRNA构建没有问题。下面我会具体说明为什么。 测序正确说明了什么? shRNA序列(包括发夹结构、目标序列)与设计一致: 如果你对构建后的质粒进行了Sanger测序,序列结果和你设计的shRNA完全一致,这说明你的克隆步骤(连接、转化等)是成功的。这意味着你至少在DNA水平上构建了正确的序列结构。 但这并不代 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应,这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA,通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚,并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染(Entranster)与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究的 …
阅读更多 »RNA转染与胰高血糖素样肽-1和成骨细胞增殖和分化研究
之前研究已经证明,胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂有利于骨骼代谢和合成。然而,GLP-1是否可以直接影响成骨细胞介导的骨形成仍存在争议,其分子机制有待进一步阐明。现分享一篇RNA转染(Entranster)与胰高血糖素样肽-1和成骨细胞增殖和分化研究的文献,以供参考。
阅读更多 »siRNA转染(entranster)与成纤维细胞瘤细胞(l929-a)研究
L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染(entranster …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »两个shRNA在转录水平和蛋白水平都有效抑制了基因表达,但是表型做出来却不一致,是为什么?
这种情况可能是由多种因素引起的,以下是一些可能的原因: 转录水平和蛋白水平的不同调控机制:虽然shRNA能够有效地降低目标基因的mRNA和蛋白表达,但有时候蛋白质的功能并不完全依赖于其表达量。有可能是基因表达抑制后,细胞通过一些补偿机制(比如其他途径的上调或活化)来恢复其功能,导致表型不一致。 shRNA的特异性和脱靶效应:shRNA可能会靶向与目标基因相似 …
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