RNA转染

用siRNA进行transient transfection不稳定，几代细胞以后，症状就会消失，所以在转染几天（1-3）后要立刻抽提蛋白，进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染，如果质粒含有抗生素位点，可以进行筛选，获得较稳定的细胞株系，但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染（infection），抗生素筛选后，可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …

脊髓损伤（SCI）是一种常见的创伤，在损伤组织初始损伤后小时和几天内会有二次细胞变性的发生，会影响到感觉和病变部位运动信号以及神经系统的传导。脊髓损伤后的神经退行性疾病是严重的，其中许多与SCI患者终生残疾有关。现分享一篇RNA转染（Entranster）与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究的文献，以供参考。

可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …

为保证RNA转染的高效率，在转染过程中应注意： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境 …

       近年来，对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1（GLP-1）及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用，如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而，对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染试剂（Entranster）与利拉鲁肽和 …

前列腺癌是男性常见的癌症。其在中国的发病率在男性恶性肿瘤中占第六。目前，以多西他赛为主的化疗是激素难治性前列腺癌的首选治疗方法，可以适当提高患者的生存率。然而，化疗耐药仍是前列腺癌治疗的主要障碍。肿瘤细胞的耐药性不仅延缓了治疗周期，而且增加了毒性。化疗药物的副作用，已成为化疗失败的主要原因之一。现分享一篇RNA转染（Entranster）与前列腺癌细胞紫杉醇 …

Q1：如果慢病毒载体中没有抗性标记，只有GFP，请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗？ A1：采用流式分选是流式细胞仪的一个功能，有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都有专门的人员操作，不需要自己动手。由于没有抗性，需要注意分选过程的无菌操作。 Q2：RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株，什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗，目的RNA所编码蛋白 …

       调节性T（Treg）细胞亚群及其特异性转录Foxp3是通过控制效应器T（Teff）细胞反应维持免疫稳态的独特细胞类型。尽管有Treg/teff紊乱的Treg细胞中的缺陷通常会导致自身免疫性疾病，但其确切机制尚未完全揭示。现分享一篇RNA转染（entranster）与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究的文献，以供参考。 …

      骨质疏松症是一种以骨密度和骨强度降低为特征的疾病，常见于老年人。Caveolin-3（Cav3）是caveolae膜结构域的主要结构蛋白，已被报道可参与细胞信号传导和维持细胞结构。现分享一篇RNA转染（entranster）与Cav3通过Wnt信号通路对骨质疏松大鼠模型骨形成的影响研究的文献，以供参考。 文献地址：https://link.spr …

长链dsRNA 不能用于多数哺乳动物细胞中，这是由于它能诱导干扰素反应而引发基因表达和细胞凋亡的变化。本方案介绍了一种向哺乳动物细胞中转入短的双链siRNA 的方法，双链siRNA 因其长度过短而不能引起与dsRNA 相关的序列非特异性反应。本方案适用于24 孔板中生长的细胞。如果使用了其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿，则需要根据培养孔的表面积换算细胞密度 …