当实验中途停止或结束时,实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物,原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。 一、蛙 类 常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住,露出头部,左手执蛙,并用食指按压其头部前端,拇指按压 …
阅读更多 »体内转染siRNA(Entranster)与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征,神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制,包括阿尔茨海默氏病(AD)。触发受体表达髓系细胞(TREM)2是一种新的AD致病基因,但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA(Entranster-in vivo)敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献,文献 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与幽门螺杆菌诱导的TRAF1上调对感染细胞的抗凋亡作用研究
肿瘤坏死因子受体相关因子1(TRAF1)是TRAF家族成员之一,在动脉粥样硬化、淋巴瘤、实体瘤等疾病中有异常表达,但TRAF1在胃癌中的作用尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与幽门螺杆菌诱导的TRAF1上调对感染细胞的抗凋亡作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与氧化应激诱导单核细胞坏死研究
细胞坏死是一种缺乏细胞凋亡和自噬特征的细胞死亡。在过去的几年里,人们发现坏死的发生和过程是程序化的,并且受到严格的调节。大量研究表明,死亡配体(如CD95L、TNF和TNF相关的凋亡诱导配体)诱导依赖于含死亡结构域(dd)激酶rip1活性的caspase独立的坏死样细胞的死亡。虽然坏死的诱导机制越来越清楚,但这一过程的执行仍然有些难以捉摸。现分享一篇ECL发 …
阅读更多 »ECL发光液与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究
衰老在心血管系统中表现出深刻的结构和生理变化。氧化应激是衰老过程中的一个重要因素,它与各种年龄相关的心血管疾病有关。然而,老化心脏中氧化应激的潜在机制仍不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sci-hub.shop/10.1016/j.bbrc.2 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究
缺血性中风是导致全球范围内死亡和残疾的主要原因之一,是一个重大的公共卫生问题。为了阐明了缺血性脑损伤的病理机制,科研人员付出了巨大的努力。为此,针对中风引起的神经炎症是治疗中风的一个有吸引力的策略。现分享一篇体内转染(Entranster)与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »揭秘RNAi,缔造实验神话
用siRNA进行transient transfection不稳定,几代细胞以后,症状就会消失,所以在转染几天(1-3)后要立刻抽提蛋白,进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染,如果质粒含有抗生素位点,可以进行筛选,获得较稳定的细胞株系,但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染(infection),抗生素筛选后,可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …
阅读更多 »siRNA转染后细胞出现死亡是什么原因?
siRNA转染后细胞死亡,原因也是多样的,如脂质体毒性,转染浓度过高,转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生,这种情况下就需要适当优化转染条件;可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂,如Entranster试剂,另外,如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的,出现细胞死亡 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与幽门螺杆菌通过cAGA依赖性机制抑制TRAF1的裂解研究
胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,也是导致癌症死亡的第三大原因。幽门螺杆菌(H.pylori)是一种革兰氏阴性、螺旋状的病原体,是慢性胃炎、胃溃疡、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的一个强有力的危险因素。幽门螺杆菌的致病机制主要取决于细菌间的相互作用。因素和宿主细胞。幽门螺杆菌(H.pylori)的最佳毒力决定因子是细胞毒素相关基因致病岛(CAG PAI)和 …
阅读更多 »siRNA答疑专题总结(上)
Q1:如果慢病毒载体中没有抗性标记,只有GFP,请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗? A1:采用流式分选是流式细胞仪的一个功能,有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都有专门的人员操作,不需要自己动手。由于没有抗性,需要注意分选过程的无菌操作。 Q2:RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株,什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗,目的RNA所编码蛋白 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享