英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
标题 Hyperacute rejection-engineered oncolytic virus for interventional clinical trial in refractory cancer patients （用于难治性癌症患者介入临床试验的超急性排斥反应工程化溶瘤病毒） 影响因子 IF = 66.85（Cell 期刊的2023年影响因 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与JMJD6和p53及结肠癌发生之间关系研究
umonji域包含6（JMJD6）是JumonjiC结构域蛋白家族的一个成员。相比于其他的家庭成员，JMJD6细胞活性仍不明确，其生物学功能仍然是很大的未开发。现分享一篇文献，文献中我报道JMJD6与肿瘤抑制基因p53相关，文献中用RNA转染（Entranster）研究JMJD6和p53及结肠癌发生之间的关系，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与STAT3和髓源性抑制细胞研究
髓源性抑制细胞（MDSC）是一种免疫抑制性网络的主要组成部分。STAT3在调节MDSC方面有重要作用。现分享一篇用RNA转染试剂Entranster-R4000转染miRNA与STAT3和MDSC研究的文献，研究中指出，STAT3的表达可能是由miR-17-5p和miR-20a调节的，研究结果表明miR-17-5p和miR-20a可能通过阻断S …
阅读更多 »问：现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里，质粒有10000bp，是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒，过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落，延长培养时间后有个别单菌落，但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢？
以下是详细的优化建议： 优化质粒用量（首要调整）： 问题： 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度（ng/µL），而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小，如果质粒浓度较高，实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理： 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应，严重降低转化效率，尤其对大质粒（&g …
阅读更多 »体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究
哺乳动物的肾再生已被报道贯穿其一生。损伤后，存活的成熟肾细胞或肾干细胞迁移到受损区域，增殖并重新分化为新的体细胞。然而，实现临床意义的再生已被证明是极具挑战性的，因为肾再生修复是不完整的，不能完全恢复肾脏自己功能。现分享一篇体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究的文献，以供参考。 文献地址：https://www.ncbi. …
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤（Osteosarcoma，OS）是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型，具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童，首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤，起源于间充质（因而是肉瘤）的原始转化细胞，表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染（entranster）与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
阅读更多 »DNA转染与免疫毒素CCL25-PE38抗急性T淋巴细胞白血病实验研究
白血病在全球发病率呈上升趋势，我国白血病发病率为十万分之三，每年约新增40 000 例患者。白血病表现为骨髓造血组织恶性增生，形成大量异常的白细胞，广泛浸润组织器官，引起多种组织器官不可逆损害，直接威胁患者生命。白血病的转移、复发与白血病细胞及其生长微环境相互作用密切相关。免疫毒素是一种由抗体或细胞因子与化学毒素耦合组成的融合蛋白。通过受体介导 …
阅读更多 »ECL发光液与S-periaxin二聚反应中的分子间二硫键研究
Periaxin最初是从哺乳动物周围神经系统（PNS）的髓鞘化施万细胞中鉴定出来的，它通过膜-蛋白相互作用在稳定施万细胞-轴突单元中起着重要作用。Periaxin蛋白占PNS蛋白含量的16%。Periaxin基因缺失或突变导致脱髓鞘周围神经病变，如Charcot–Marie–Tooth病4F、腓骨肌萎缩、遗传性运动和感觉神经病变以及隐性Dej …
阅读更多 »体内转染与microRNA-155和对乙酰氨基酚诱导的肝脏炎症研究
人体肝脏承担着多种任务，包括解毒，代谢废物的排出、营养摄取和储存、总能量代谢和重要血清蛋白的分泌。其特殊功能使肝脏成为一个极易受到毒性损伤的器官，可能引发肝脏炎症和随后的纤维化和终末期组织损伤。在所有肝毒性化学损伤中，对乙酰氨基酚（APAP）过量被认为是西方国家急性肝衰竭的最常见原因。虽有报道称，美国50%以上的急性肝衰竭病例都与APAP中毒有关 …
阅读更多 »细胞RNA转染实验的一些建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
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