慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。 以下是一些常见的原因和解决方法: 1) 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 2) 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染 …
阅读更多 »慢病毒滴度的计算
实验准备 目标细胞:选择适合慢病毒感染的细胞株(如 HEK293T 或靶细胞)。 病毒稀释:对病毒原液进行一系列梯度稀释(如 10−1,10−2,10−3,10−4)。 感染细胞:将稀释后的病毒感染到目标细胞中,确保设置对照组(未加病毒)。 培养:培养 48-72 小时(根据病毒系统和荧光/抗性蛋白表达时间调整)。 检测方法:检测报告基因表达水平(如荧光蛋白 …
阅读更多 »PD-1沉默对CAR-T细胞影响研究
文献标题 PD-1 silencing impairs the anti-tumor function of chimeric antigen receptor modified T cells by inhibiting proliferation activity 影响因子 8.676(Journal for ImmunoTherapy of Cance …
阅读更多 »靶向eIF4G1根除胰腺癌研究
文献标题 Reprograming immunosuppressive microenvironment by eIF4G1 targeting to eradicate pancreatic ductal adenocarcinoma 期刊与影响因子 期刊: Cell Reports Medicine 影响因子:14.3(2024年) 英格恩(Engree …
阅读更多 »慢病毒感染中细胞密度需要考虑的因素
细胞类型: 不同细胞系对慢病毒的感染效率不同。例如,一些细胞对病毒更敏感,需要更低的病毒量和细胞密度。 敏感细胞系(如HEK293T):种植密度可稍低; 难感染细胞系(如原代细胞):需要更高密度。 病毒滴度: 如果病毒滴度高,细胞密度可以稍低。 如果病毒滴度较低,建议适当提高种植密度,并配合 增强试剂(如Envirus-LV) 提高感染效率。 LV感染目标: …
阅读更多 »AAV病毒-细胞外RNAs-TLR3信号通路认知障碍研究 (IF:39.3)
文献标题:Extracellular RNAs-TLR3 signaling contributes to cognitive impairment after chronic neuropathic pain in mice 影响因子:Signal Transduction and Targeted Therapy 是Nature旗下期刊,2023年影响因 …
阅读更多 »AAV病毒感染,tu/ml和vg/ml 的单位如何 换算
在AAV病毒感染实验中,TU/mL(转导单位每毫升,Transduction Unit per milliliter)和vg/mL(病毒基因组拷贝数每毫升,Viral Genome copy per milliliter)是两种常见的病毒滴度单位。它们表示的是病毒浓度的不同方面: TU/mL:代表的是真正具有转导能力的AAV颗粒的数量,也就是能够在宿主细胞中 …
阅读更多 »慢病毒转染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享