2026年 1 月 29日, 星期四
新闻

蛋白和酶

蛋白质的水平测定-含有去污剂的情况

去污剂是蛋白质生命的一部分,用于细胞裂解以及变性蛋白质,但是去污剂会干扰蛋白质水平和蛋白质功能的测定。 要测定含有去污剂的样品中蛋白质的水平,可以有两个选择: 标准曲线的测定中包括相同比例的去污剂。得到一个准确的定量是必须的。去污剂会影响标准曲线的线性读数,你可以稀释样品到线性范围,但是对于低浓度的蛋白质样品这个方法不可行。 用可以带有去污剂的蛋白质测量方法 …

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Western-Blot中BSA,脱脂蛋白的作用是什么?

经常有人做Western-Blot会疑惑:为什么做蛋白实验,应该把杂蛋白去除才对,会担心其他蛋白的加入会影响实验结果,增加背景。但为什么偏偏会用加入BSA,脱脂蛋白的方法减少背景呢? 这需要从Western-Blot的原理说起,Western-Blot中电泳转膜后让蛋白分布NC膜或PVDF膜上,但膜上还有很多地方是空白的,这些空白的地方如果不被封闭,很可能就 …

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western-blot实验注意事项

• 滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸>=膜>=胶。 • 滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡,气泡会造成短路。 • 因为DEPF膜的疏水性,膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中,膜也必须随时保持湿润(干膜法除外)。 • 滤纸可以重复利用,上层滤纸(靠膜)内吸附有很多转移透过的蛋白质,所以上下滤纸一定不能弄混,在不能分辨的情况下,可以将靠胶滤 …

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WB发光检测中常见的问题及解决方法

免疫印迹试验(Western blot)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,被广泛应用于蛋白表达水平的研究、抗体活性检测和早期疾病诊断等多个方面。其中较为简单也为大家所普遍接受的Western blot显色方法为底物化学发光法ECL,文章根据发光检测中常见的几种问题现象与各位生物人一起探讨。疫印迹试验(Western blot)是分子生物 …

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