1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »机器学习识别氧化磷酸化特征用于卵巢癌预后和个体化治疗
文章标题 《基于机器学习的氧化磷酸化特征识别在卵巢癌预后、免疫浸润和药物敏感性中的应用》 英文标题:Machine learning-based identification of an oxidative phosphorylation signature for prognosis, immune infiltration, and drug sensi …
阅读更多 »siRNA转染后目标基因不降反升的原因
一、生物学与分子机制相关原因 1️⃣ 负反馈调控 (feedback regulation) 某些基因被抑制后,会触发细胞的代偿机制。 例如,目标基因下调后,上游转录因子或信号通路被激活,从而 反向上调目标基因 的转录。 特别常见于信号通路核心分子(如 MAPK、PI3K、NF-κB、p53 等)的 knockdown 实验。 建 …
阅读更多 »RNA转染P4E6细胞效果图(Entranster)
RNA转染与LncRNA SNHG12对胃癌细胞BGC-823增殖影响的研究
胃癌是一种常见的上皮性癌,是世界范围内最常见的第五种恶性肿瘤。近年来胃癌的发病率一直呈上升趋势。每年约有一百万例胃癌发生,其中东亚地区占到50%,尤其是中国,严重危害人民健康和生命。中国胃癌的年发病率约为400000,占全世界病例总数的42%,并且总死亡率逐年上升。因此,寻找可靠的胃癌标志物和靶点是至关重要 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究
最近的一些报道表明,与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA;SaRNA(小激活dsRNA)]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达,这种现象被称为RNAa(RNA激活)。然而,关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子,以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究的文献 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与骨髓细胞分化研究
免疫细胞系的规范和功能受祖细胞起源和环境因素的影响。免疫细胞如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子,其在炎症环境中的分化机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染miRNA(Entranster)与骨髓细胞分化研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染研究
如今,人类胚胎干细胞中小干扰RNA(siRNA)或质粒DNA(pDNA)低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染的文献,以供参考。
阅读更多 »siRNA转染和DNA转染有什么不同?
首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。 其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于过量表达的DNA转染 …
阅读更多 »RNA转染(entranster)与miRNA-183促进黑质神经元凋亡研究
帕金森病是一种常见的神经系统疾病,是典型的纹状体功能障碍模型。它是仅次于阿尔茨海默病的第二常见神经退行性疾病。帕金森病的特征之一是黑质多巴胺能神经元的逐渐丧失。帕金森病患者通常有震颤、僵硬和运动迟缓的症状。遗传因素和环境因素已被纳入帕金森病的病因。对下丘脑核进行高频脑深部刺激是一种流行的外科治疗方法,但不适用于早期的PD,发展中国家的患者也无法获得。现分享一 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享