英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制研究
随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化，骨关节退行性病变已成为高发疾病，其中代表性疾病之一为骨性关节炎（osteoarthritis, OA）。最近研究表明：WISP-１ 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-１ 在正常软骨和滑膜中几乎不表达，而在退变的软骨及滑膜（如OA）中WISP-１异常增高，通过诱导ＭＭＰs及aggrecanases的分泌而促进胶 …
阅读更多 »siRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与三氯乙烯和肝癌发生的研究
三氯乙烯（TCE）是一种挥发性有机化学试剂，已广泛应用于工业有机溶剂中，是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一，TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道，TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中，TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌（HCC），但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster） …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染实验步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
阅读更多 »miRNA转染（Entranster）与白细胞介素IL-23受体和甲状腺炎研究
Hashimoto甲状腺炎（HT）是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病，其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体（IL-23R）越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点，包括Hashimoto甲状腺炎（HT）。然而，调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染（Entranster-R4000）与白细胞介 …
阅读更多 »RNA转染与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究
食管癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，预后差。化疗耐药和癌症复发是其治疗中最困难的问题之一。识别潜在的分子机制是发展新疗法的关键。现分享一篇RNA转染（Entranster）与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（entranster）与il-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞（oe-mscs）是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。oe-mscs通过调节t细胞的反应，包括调节性t细胞（treg）的上调和th1/th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子，il-17在胶原诱导性关节炎（cia）的发展过程中起着关键的作用。然而，目前尚不清楚il-17水平的升高是否会影响oe-mscs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与启动子相关的小双链RNA激活研究
最近的一些报道表明，与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA；SaRNA（小激活dsRNA）]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达，这种现象被称为RNAa（RNA激活）。然而，关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子，以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染（Entra …
阅读更多 »