英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA（Tanshinone IIA，Tan IIA）是一种从丹参干根中提取的生物活性物质，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染（Entranster）的方法的文献，通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制，以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »如何能够做好siRNA转染实验？
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »siRNA转染（Entranster）与细胞骨架蛋白和肝肺综合征研究
肝肺综合征（HPS）是肝病，肺内血管扩张（IPVD）和低氧血症的三联征，动脉低氧血症可引起肺血管重构（PVR）。在最近的研究中，与HPS有关的PVR中肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用已确定；细胞骨架蛋白的变化在细胞增殖中起着重要的作用。但与HPS有关的PVR中细胞骨架蛋白表达与分子机制相关性知之甚少。现分享一篇siRNA转染（Entranster- …
阅读更多 »RNA转染与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子（BLyS），一种肿瘤坏死因子超家族成员，是一种有效的体内外B细胞共活化剂，可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤（浆细胞）。先分享一篇RNA转染（Entranster）与B淋巴细胞刺激因子（BLyS）和多发性骨髓瘤（MM）研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞转染siRNA后，目标基因的表达反而升高的原因是什么？
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起，常见的因素包括： siRNA设计不合理： siRNA的靶点选择不佳，未能有效靶向目标基因的mRNA，导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题： 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞，从而未能有效抑制目标基因。 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究
肠上皮表面由一层柱状上皮细胞构成，形成一个与大多数管腔内细菌直接接触的屏障，在防止细菌易位中起着重要作用。肠上皮屏障功能在炎症性肠病（IBD）的发病机制中起着至关重要的作用，但其机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染（engreen）与树突状细胞表观遗传修饰研究
根据不同的环境，树突状细胞（DC）可能变现为活跃或耐受性，但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染（Entranster-R4000）与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献，显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs（DC）分化为活性或耐受DC。
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
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