英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是 …
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »mRNA细胞转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下mRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么 …
阅读更多 »RNA转染与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究
调节性T（Treg）细胞亚群及其特异性转录Foxp3是通过控制效应器T（Teff）细胞反应维持免疫稳态的独特细胞类型。尽管有Treg/teff紊乱的Treg细胞中的缺陷通常会导致自身免疫性疾病，但其确切机制尚未完全揭示。现分享一篇RNA转染（entranster）与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究的文献，以供参考。 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与桥本甲状腺炎患者T辅助细胞1型细胞研究
桥本甲状腺炎（Hashimoto’s thyroiditis ，HT），又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎，是一种器官特异性自身免疫性疾病，特点是甲状腺实质淋巴细胞浸润，弥漫性甲状腺肿大和自身抗体升高的升高，主要包括抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb）和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）。HT现在被认为是最常见的自身免疫性疾病，常与其他自身免疫性疾病相关，如Graves病 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子（BLyS），一种肿瘤坏死因子超家族成员，是一种有效的体内外B细胞共活化剂，可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤（浆细胞）。先分享一篇RNA转染（Entranster-R4000）与B淋巴细胞刺激因子（BLyS）和多发性骨髓瘤（MM）研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染P4E6细胞效果图（Entranster）
miRNA转染（Entranster）与骨髓细胞分化研究
免疫细胞系的规范和功能受祖细胞起源和环境因素的影响。免疫细胞如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子，其在炎症环境中的分化机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染miRNA（Entranster）与骨髓细胞分化研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与LncRNA Pvt1调控骨髓源抑制细胞的免疫抑制活性研究
骨髓源抑制细胞（MDSC）通过显著阻断T细胞诱导的抗肿瘤反应参与肿瘤诱导的免疫抑制，从而影响肿瘤免疫治疗的效果。改变MDSC分化和功能的治疗可以部分恢复抗肿瘤免疫反应。长非编码RNA浆细胞瘤变异体易位1（lncrna-pvt1）是多种癌症类型的潜在癌基因。然而，目前还没有完全阐明lncrna-pvt1是否参与MDSCs的调节。 现分享一篇RNA …
阅读更多 »siRNA细胞转染注意事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
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