1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »siRNA转染和DNA转染有什么不同?
首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。 其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于过量表达的DNA转染 …
阅读更多 »RNA转染与MDSC细胞和原发性干燥综合征研究
原发性干燥综合征(PSS)是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的,主要是唾液腺和泪腺,导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚,但许多研究已经证实树突状细胞(DCS)、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现,Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞(MDSC)是具有免疫抑制 …
阅读更多 »siRNA转染实验注意事项
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »怎么样做好siRNA细胞转染实验?
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研究
越来越多的证据表明,细胞焦亡和炎性细胞程序性死亡与动脉粥样硬化有关;然而,其潜在的机制仍有待澄清。二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DHM),一种天然的黄酮类化合物,据报道有抗氧化和抗炎的生物活性。然而,DHM对于动脉粥样硬化相关细胞焦亡的影响尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制 NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研 …
阅读更多 »RNA转染P4E6细胞效果图(Entranster)
RNA转染过程中细胞毒性大怎么办?
RNA转染时细胞毒性大可能的原因有: 1.RNA与转染试剂比例不佳。建议进行预实验优化。 2.细胞密度不佳。调整细胞密度。 3.细胞污染。建议彻底清洁所有细胞培养相关用品。 4.转染试剂毒性较大。建议选择毒性较小的非脂质体转染试剂,如纳米材料的Entranster试剂等。
阅读更多 »RNA转染与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究
长链非编码RNA在人肝癌(HCC)中异常表达,并与HCC的进展有关。lncRNA linc0511(linc0511)已被证实在一些肿瘤中作为肿瘤启动子。然而,作为一中新颖的LncRNA,linc00511的具体功能仍然不是很清楚。现分享一篇RNA转染(engreen)与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究的文献,旨在评估 …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
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