英格恩技术资料

      使用Entranster-E试剂进行电转染实验时，要求使用纯度高、无菌且序列正确的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。尝试在250-750nM最终浓度范围内的siRNA浓度。Engreen建议导入一个非靶向或无意义的siRNA控制序列，以验证siRNA的基因特异性。此外，针对具有多个siRNA序列的基因可确保产生的表型不是由于脱靶效应所致 …

慢病毒（Lentivirus）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷1型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点，因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。 慢病毒有如下特点： ●　感染范围广 　 …

      Hashimoto甲状腺炎（HT）是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病，其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体（IL-23R）越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点，包括Hashimoto甲状腺炎（HT）。然而，调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染（Entranster-R4000）与白细胞介 …

下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …

        丹参酮ii-磺酸钠（ds-201）是丹参酮ii-a的水溶性衍生物，可诱导血管舒张并激活BKca通道。为了探讨ds-201在BKca通道上的作用机制，现分享一篇ECL发光液（enlight）与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究的文献，以供参考。 文献地址：https://www.nature.com/articles/aps201485

     丙戊酸钠（Valproate，VPA）是一种广谱抗癫痫药物，已广泛应用于各种抽搐，双极性，或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道，VPA治疗是一个长期的过程，甚至需要终身服药。然而，在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应（ADR），如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙 …

根据病毒的TCID50值计算给毒的MOI（Multiplicity of Infection，感染倍数）通常需要几个步骤。MOI 是指每个宿主细胞上平均感染的病毒颗粒数。 步骤概述： 知道病毒的TCID50值：TCID50 是一种病毒活性的度量，表示每单位体积（通常为每毫升）病毒悬液中，能在 50% 的细胞文化中引起感染的病毒数量。单位通常是病毒颗粒数/毫升 …

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …

前列腺癌是男性常见的癌症。其在中国的发病率在男性恶性肿瘤中占第六。目前，以多西他赛为主的化疗是激素难治性前列腺癌的首选治疗方法，可以适当提高患者的生存率。然而，化疗耐药仍是前列腺癌治疗的主要障碍。肿瘤细胞的耐药性不仅延缓了治疗周期，而且增加了毒性。化疗药物的副作用，已成为化疗失败的主要原因之一。现分享一篇RNA转染（Entranster）与前列腺癌细胞紫杉醇 …

多梳抑制复合物2（PRC2），可对H3K27三甲基化（H3K27me3），是肿瘤发生发展的一部分，和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染（Entranster）与多梳抑制复合物2（PRC2）和肿瘤研究的文献，以供参考。