英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的临床事件，可自发或由程序相关的动脉粥样硬化斑块破裂急性冠状动脉综合征患者，特别是在经皮冠状动脉介入治疗（PCI）导致。大隐静脉移植物经皮介入治疗的发生率高达45%。由CME引起的短暂“无血流”或“慢血流”是急性心肌梗死患者长期预后不良的独立预测因素。此外，CME还可导致渐进性心肌功能异常，包括显性心肌梗死、收缩功能障碍、心 …
阅读更多 »siRNA转染效率不佳的原因
1. siRNA与转染试剂比例不佳 由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了siRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细 …
阅读更多 »慢病毒、腺病毒、AAV 的检测周期分别是多长？
慢病毒 腺病毒 腺相关病毒 外源基因表达时间 2-4天开始表达长时间稳定表达 1-2天开始表达 持续7-14天 7-14开始表达 细胞分裂不旺盛部位可长时间表达 AAV一般注射动物后，会在1周左右开始表达，体内实验一般建议感染后3-4周看第一批结果。持续时间可以长达两年以上。在体内，细胞的生存周期会很长，特别是一些神经元细胞。所以只要细胞不死，AAV基本 …
阅读更多 »电转染实验时，siRNA有什么要求？
使用高纯度、无菌的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。建议在250-750nM最终浓度范围内的进行siRNA不同浓度的梯度实验。建议设置一个非靶向或无意义的siRNA对照序列，以验证实验siRNA的特异性。同时也验证，针对单个基因用多个siRNA序列实验产生的表型是否是由于脱靶 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与periaxin蛋白和施旺细胞研究
Periaxin蛋白是施旺细胞特异表达的一种蛋白，是其在周围神经髓鞘细胞骨架相关蛋白的筛选中首先被鉴定的。PRX蛋白在髓鞘形成和髓鞘的稳定起到了重要的作用，与肿瘤细胞侵袭转移密切相关。现分享一篇ECL发光液（enlight）与periaxin蛋白和施旺细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（engreen）与猪冠状动脉微栓塞研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的和重要的临床现象，急性冠状综合征（ACS），和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与linc-smad7促进成肌细胞分化和肌肉再生研究
骨骼肌来源于胚胎发育过程中的体细胞，这是一个高度协调的过程，涉及到成肌细胞增殖、分化的各个发育阶段，最终融合成多核肌管和肌纤维。这些发育阶段主要是由一系列肌源性调节因子（mrfs）确定，包括肌源性D、肌源性因子5（myf5）、肌生成素和mrf4，以及肌细胞增强因子2（mef2）家族。之前的研究表明，LncRNAs在表观遗传动力学和基因表达方面具有 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究
体外研究骨是困难的，因为它包含参干扰的各种细胞类型。骨生物连接各种器官，因此，骨骼生理学必须以完整的方式在完整的动物中进行研究。现分享一篇体内转染（Entranster）与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与冠状动脉微栓塞相关的心功能不全研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的临床事件，可自发或由程序相关的动脉粥样硬化斑块破裂急性冠状动脉综合征患者，特别是在经皮冠状动脉介入治疗（PCI）导致。大隐静脉移植物经皮介入治疗的发生率高达45%。由CME引起的短暂“无血流”或“慢血流”是急性心肌梗死患者长期预后不良的独立预测因素。此外，CME还可导致渐进性心肌功能异常，包括显性心肌梗死、收缩功能障碍、心 …
阅读更多 »动物体内转染，局部注射后应如何取样？
使用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行体内转染实验时，由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的 …
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