英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
小干扰RNA（siRNA）在基因功能研究和药物开发方面扮演着重要的角色。最近，通过化学修饰作用设计出对光不稳定的siRNA，从时间和空间上来阐明基因额沉默过程。现分享一篇体内转染（Entranster）与小鼠基因表达光调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »慢病毒感染细胞常见问题分析
1.用于慢病毒感染的细胞接种量是多少？ 根据细胞增殖的速度调整细胞接种量，以保证在感染后4天左右细胞刚好快长满培养皿底部为宜。 针对大部分细胞系：传代周期在2-3天，感染时细胞铺板的密度保持在20-30%左右，则72h后细胞增殖后铺板密度约在90%左右； 针对某些原代细胞： 由于细胞增长缓慢，可以在接种时提高汇合度到50%～60%，但要确保在感染后4天时细胞 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之四——实验动物的除毛、给药方法
一、实验动物的除毛 在动物实验中，被毛有时会影响实验操作与观察，因此必须除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脱毛等。 (一)剪毛法：剪毛法是将动物固定后，先用蘸有水的纱布把被毛浸湿，再用剪毛剪刀紧贴皮肤剪去被毛。不可用手提起被毛，以免剪破皮肤。剪下的毛应集中放在一容器内，防止到处飞扬。给狗、羊等动物采血或新生乳牛放血制备血清常用此法。 (二)拔毛法：拔毛 …
阅读更多 »慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中，设置复孔的作用?
在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中，设置复孔主要有以下几个作用： 提高实验数据的可靠性由于生物实验存在一定的随机误差，复孔可以减少实验数据的偶然性，提高测量的准确性和重复性。 计算平均值，减少误差即使计算滴度时可能未直接用到每个复孔的数据，而是取某个稀释度下的阳性孔（如GFP阳性细胞数或抗生素筛选存活细胞数），但通常会计算复孔的平均值，以降低误差。 观察实验一 …
阅读更多 »基于仿生纳米颗粒的HBV(乙型肝炎病毒)基因治疗研究
文献概要 标题: Enhanced Delivery of CRISPR/Cas9 System Based on Biomimetic Nanoparticles for Hepatitis B Virus Therapy 期刊: Journal of Controlled Release 影响因子: 11.467 (2024年) 研究内容 该研究开发了一 …
阅读更多 »病毒转染原理及步骤
病毒转染原理及步骤 在细胞相关的实验操作中，对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞，通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率，以达到目的基因的高效瞬时表达。 病毒转染包括以下步骤：1构建载体 2包装提纯病毒 3感染靶细胞。以慢病毒为例。 慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起 …
阅读更多 »体外转录法制备dsRNA中，怎么知道mRNA的靶区域在哪
在体外转录法制备dsRNA（双链RNA）的过程中，确定mRNA的靶区域是关键的一步。以下是一些常用的方法和步骤，以帮助确定mRNA的靶区域： 1. 目标基因的选择 首先，确定你想要抑制或研究的目标基因。你需要有这个基因的完整序列信息（通常从基因数据库中获得，如NCBI）。 2. 设计siRNA或shRNA序列 设计小干扰RNA（siRNA）或小发夹RNA（s …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究
MirRNAs不仅参与肿瘤的形成，也与肿瘤的分化和侵袭过程有关。然而，目前检测miRNA表达的方法有很大的缺点，如侵入性和不可再生性。上皮间质转化（EMT）在肿瘤转移和耐药方面具有重要作用。现分享一篇体内转染（Entranster）与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与PPARα调节肿瘤细胞的增殖和衰老研究
肉碱棕榈酰转移酶（Carnitine palmitoyltransferase 1c，cpt1c），位于线粒体膜外，在脂肪酸的转运和氧化中起着关键的作用。它也参与细胞增殖，是癌细胞衰老的潜在驱动力。然而，其上游调控机制是未知的。过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARαα）是一个配体激活转录因子，可调节脂质代谢和肿瘤进展。现分享一篇ECL发光液（enlight） …
阅读更多 »转染siRNA后，可以收集细胞重新铺板吗？
转染siRNA后，通常是会影响细胞的基因表达，但是否可以重新铺板要考虑几个因素。一般情况下，如果转染后需要重新铺板，建议采取以下步骤： 转染后的时间点：siRNA的效果一般需要在转染后24-48小时才能显现，因此在这个时间段内，你不应该轻易处理细胞。若重新铺板，需要确保转染后的时间足够，能让siRNA充分发挥作用。 细胞状态：如果在转染后细胞健康状况良好，并 …
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