运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后,针对具体的组织器官,不同的注射方法会明显影响效果。比如,大脑神经细胞的体内转染,可以采用尾静脉注射和侧脑室注射,用侧脑室的方法就好得多。再比如,肺部的体内转染,用气管灌注就比用尾静脉注射的方法好得多。体内转染试剂和核酸的混合物与靶器官的接触越直接越充分,效果越好。干扰效率可以理解为干扰的细胞数量和全部细胞的 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与大鼠海马体癫痫导致的P-糖蛋白过度表达研究
脑内p-糖蛋白(P-gp)的过度表达是导致耐药性癫痫的重要因素。P-gp抑制剂由于其全身毒性而受到临床应用限制。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与大鼠海马体癫痫导致的P-糖蛋白过度表达研究的文献,以供参考。
阅读更多 »Journal of Cellular Physiology | 西北工业大学生命科学院报道:治疗骨质疏松症新机制
该团队在《Journal of Cellular Physiology 》期刊上发表了题为“A novel long noncoding RNA AK016739 inhibits osteoblast differentiation and bone formation”论文。文章通过RNA体内转染(EntransterTM-in vivo, …
阅读更多 »体内转染与TAR DNA结合蛋白功能丧失和继发性脑损伤研究
TAR DNA结合蛋白-43(TDP-43)是一种多功能的DNA和RNA结合蛋白,参与RNA转录、选择性剪接,并可调节细胞中mRNA的稳定性。TDP-43已被证明是患有肌萎缩侧索硬化症(ALS)和额颞叶变性(FTLD)患者中神经元和胶质细胞包涵体病理学培养基的关键组分。最近的报告表明,TDP-43蛋白是一种 …
阅读更多 »RNA转染与B细胞成熟抗原和多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BCMA)是BAFF …
阅读更多 »做嘌呤霉素筛选滴定时,感染两天,puro杀3天,5天细胞长得很密原因和解决方法,另外镜下数整个孔的克隆数感觉困难,能换成镜下视野面积与孔面积比换算吗?
问题1:“感染两天,puro杀3天,5天细胞都长很密” 原因: 细胞分裂快(比如 293T)→ 在5天内即使有筛选,还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性,嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议: 缩短时间:感染 24h 后就加 puromycin,第 2 天开始杀,杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度:推荐加大稀释倍数:1:1000,1:5000,甚至 …
阅读更多 »质粒被酶切过还可以电转吗?
可以,但得分情况来看: 如果质粒是线性化了(即被酶切成线状DNA): 可以电转,但是效率明显低于超级螺旋质粒(超螺旋 plasmid,通常是未切割、天然状态下的质粒结构)。 线性质粒在细胞内容易被核酸酶降解,稳定性和转化成功率比超螺旋质粒低很多。 有些时候,比如做基因组编辑(CRISPR knock-in)、整合型表达载体(需要基因组插入时),反而故意使用线 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BCM …
阅读更多 »CCK8实验时,必须预培养细胞吗?
不一定。如果要向保持细胞的最好状态,建议预培养细胞。如果不做细胞预培养,细胞内的脱氢酶可能会不稳定。也有人不做细胞预培养,但在做标准曲线和检测时需要统一检测条件。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
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