英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
神经性疼痛是指由影响躯体感觉系统的病变或疾病引起的疼痛，属于慢性疼痛。神经性疼痛的病理生理特征是自发性疼痛、热痛觉过敏或疼痛过敏。目前对神经性疼痛的药理学方法仅能使大约50%的患者疼痛减轻30-50%。再加上这些治疗的疗效有限，不可忍受的副作用，依从性较低，神经性疼痛仍然难以治疗，因此，迫切需要研究和开发新的神经性疼痛药物。现分享一篇体内转染（e …
阅读更多 »siRNA转染至细胞有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »质粒DNA转染实验效率影响因素
1， 质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 2， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的 …
阅读更多 »在CCK8显色过程中，如何终止反应？
有以下几种方法（96 孔板）： ①在显色反应后，将培养板放置4℃冰箱内。②每孔加10μl 0.1 M HCL 溶液。③每孔加10μl 的 1%（w/v）的SDS（十二烷基硫酸钠）溶液。注意：反应停止后，应在24 小时之内测定。 如需了解更多关于CCK8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »如何优化RNA转染条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »体内转染与大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡和行为恢复研究
外伤性脊髓损伤（T-SCI）是世界范围内常见的一种损伤，常导致严重的神经功能缺损和渐进性退化。T-SCI的病理是原发性损伤和继发性损伤的结果。原发性损伤指的是直接导致脊髓结构损伤，包括细胞死亡、局部轴索损伤、血管破裂以及损伤部位周围的局灶性出血。继发性损伤是由原发性损伤引起的各种分子、细胞和生化反应引起的 …
阅读更多 »RNA转染与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究
脊髓损伤（SCI）是一种常见的创伤，在损伤组织初始损伤后小时和几天内会有二次细胞变性的发生，会影响到感觉和病变部位运动信号以及神经系统的传导。脊髓损伤后的神经退行性疾病是严重的，其中许多与SCI患者终生残疾有关。现分享一篇RNA转染（Entranster）与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（entranster）与核粒梭杆菌和5-氟尿嘧啶在结直肠癌中的化疗抗性研究
新的证据表明肠道微生物群与宿主对化疗药物（包括5-氟尿嘧啶（5-Fu））的反应之间存在潜在关系。有核梭杆菌（FN）与结直肠癌（CRC）的发生和发展有关。不幸的是，对FN感染与化疗疗效之间的关系知之甚少。现分享一篇体内转染（entranster）与核粒梭杆菌和5-氟尿嘧啶在结直肠癌中的化疗抗性研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一，它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病（T2DM）相关。在NAFLD中，肝脏发生过量脂质合成（ELS），主要包括新的脂肪生成和三酰甘油（TG）以及极低密度脂 …
阅读更多 »客户问：你好，如果电转以后抗性板子上一个没长，无抗的都长满了，这种情况是没电进去，需要增加次数吗，还是其他原因呢？
回答：“无抗的都长满”，说明细胞活性和数量没问题，基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点：质粒浓度是否足够（建议>100ng/μL）、抗性基因是否匹配（如氨苄不能用于表达AmpR的质粒）、抗性板浓度是否正确（过高会杀死阳性克隆）。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒，但残留的盐 …
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