英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1）优化条件：质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外，可选用更合适的转染试剂，如Entranster试剂。 2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »如果细胞密度低，铺板48h可以转染吗？
如果细胞密度较低，一般来说，细胞在转染前的培养时间是很关键的。48小时的培养时间通常是足够的，但是否适合转染还要考虑几个因素： 1. 细胞的生长状态 细胞在转染时最好处于对数生长期，也就是细胞在活跃分裂和增殖中。若细胞密度过低，可能会处于生长迟缓或衰退状态，这会影响转染效率。 细胞密度太低（<30%）：如果细胞太少，可能会影响转染试剂的吸附和细胞的转染 …
阅读更多 »如何做好DNA转染实验？
我认为，要想做好质粒DNA细胞转染实验，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一，它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病（T2DM）相关。在NAFLD中，肝脏发生过量脂质合成（ELS），主要包括新的脂肪生成和三酰甘油（TG）以及极低密度脂蛋白（VLDL）的合成，导致脂质积聚 …
阅读更多 »pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究
食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。其5年生存率低于30%。食管癌分为鳞状细胞癌和腺癌两大类。食管癌多为鳞状细胞癌，占食管癌的90%。近年来，尽管食管癌的治疗进展越来越快，但食管鳞癌患者的总体预后仍然很差，情况仍不容乐观。早期发现和干预对提高食管癌预后具有重要意义。现分享一篇pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染效率影响因素
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如，RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸，葡萄糖)，维生素，无机盐，和缓冲物质。有些成分非常不稳定，因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些？
1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »Mdga2缺失导致BDNF/TrkB信号异常激活，从而引发自闭症相关的突触和行为改变
文献标题：Mdga2 deficiency leads to an aberrant activation of BDNF/TrkB signaling that underlies autism-relevant synaptic and behavioral changes in mice 期刊名称：PLOS Biology 影响因子：IF = 9.8（ …
阅读更多 »