标题 Programming of Regulatory T Cells In Situ for Nerve Regeneration and Long-Term Patency of Vascular Grafts (通过原位编程调节性T细胞促进神经再生与血管移植物的长期通畅性) 影响因子 该研究发表于 Research 期刊,2022年影响因子约为 11 …
阅读更多 »3D打印仿生CACC促进H型血管形成研究
标题:3D Biomimetic Calcified Cartilaginous Callus that Induces Type H Vessels Formation and Osteoclastogenesis 期刊影响因子: Advanced Science 的2022年影响因子为 15.1(2023年最新数据请以JCR公布为准)。 概要: 本研究通 …
阅读更多 »悬浮细胞的培养
材料 装在冷冻培养瓶中的HeLa S3 细胞 70%(VIV) 乙醇 完全MEM-10 培养基, 37°C 胰蛋白酶/EDTA, 0. 25% (m/V) 胰蛋白酶/0. 02% (m/V)EDTA, 37°C 转瓶完全培养基-5, 37°C 25 cm2 组织培养瓶 湿润的、37°C 、5%CO2 培养箱 Sorvall H-6000A 转头(或相当的)和 …
阅读更多 »DEAE-葡聚糖介导的转染:高效率的转染方法
DEAE -葡聚糖介导的转染与磷酸钙共沉淀介导的转染在三个方面有重要的不同。第一,该方法用于克隆基因的瞬时表达,而不是细胞的稳定转化(Gluzman 1981 ) 。第二,该方法对BSC-1 、CV- 1 和COS 等细胞系非常有效,但对许多其他类型的细胞转染效果不理想。第三, DEAE-葡聚糖转染的DNA 用量比磷酸钙共沉淀转染少。采用0.1 ~ 1.0μ …
阅读更多 »细胞转染效率低的原因及解决方案
细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几个陷阱,望实验人员能够注意。 1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细 …
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »原代细胞的分离培养
原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官,让它们在体外维持与生长。原代培养的特点是细胞或组织刚离开机体,它们的生物性状尚未发生很大的改变,在一定程度上可反映它们在体内的状态,表现出来源组织或细胞的特性, 因此用于药物实验,尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等,是极好的工具。常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。 (一)组织块培养法 …
阅读更多 »细胞周期与细胞凋亡分析
CCAA试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是基于PI 染色(Propidium staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的试剂盒。 下面以engreen的CCAA试剂盒为例,说明一下检测方法。 1.收集并调整细胞浓度为1×106/ml,取1ml单细胞 …
阅读更多 »如何分离成纤维细胞?
下述的通用操作方案适用于小鼠、大鼠、仓鼠和鸡胚胎。选择大约一半足孕时间的胚胎最好,10 ~ 13 天龄胚胎含有最大数量的未分化的间质细胞,成纤维细胞可从这些细胞衍生获得。 胚胎的分离 适用哺乳动物(仓鼠、小鼠和大鼠) 采用认可的方案处死啮齿动物 立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。若可能,置紫外灯下照射5分钟 用无齿的摄子和剪子在前腿下作一腹部水平切 …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
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