基质凝胶培养是研究细胞与细胞、细胞与基质之间相互作用的重要方法,如细胞运动性、肿瘤细胞的侵袭转移能力的研究。现在应用最广泛的凝胶为I 型鼠尾胶原,其他还有纤维蛋白胶原、血浆胶原等。 (一)材料与设备 胶原凝胶I (collagen I) 、完全培养液、培养皿(直径35mm)、吸管、移液枪、CO2 培养箱。 (二)操作步骤 1.用完全培养液调节胶原凝胶的浓度为 …
阅读更多 »体外培养细胞的一般性质(一)
细胞的存活及生长具有贴壁依赖性 绝大多数实体组织来源的细胞,在离开机体、于体外生存生长时,都具有贴壁依赖性,即以单层形式附着在培养瓶或培养皿表面的方式生长。如果无法贴壁(如接种细胞过多、总被摇动等),则细胞将会死亡。从组织中分离出来的细胞或传代后的细胞,首先黏附于培养界面,在界面上铺展,然后才开始分裂、增殖。 细胞的黏附是通过特异的细胞表面受体与细胞外基质分 …
阅读更多 »JAM分析
此分析方法基于用[3H] -胸腺嘧啶脱氧核苷标记核DNA, 用玻璃纤维滤器获得样品。 凋亡产生的DNA 片段小到可以通过玻璃纤维滤器,因此特定样品的放射活性减少。很显然,这种分析对循环的细胞是必需的。 实验前一天,将细胞接种于新鲜培养基。对数生长期细胞可更好地掺入[3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷。 收获细胞,在新鲜培养基中以1×106细胞/ml重悬,用5 …
阅读更多 »调节性T细胞编程促进神经再生
标题 Programming of Regulatory T Cells In Situ for Nerve Regeneration and Long-Term Patency of Vascular Grafts (通过原位编程调节性T细胞促进神经再生与血管移植物的长期通畅性) 影响因子 该研究发表于 Research 期刊,2022年影响因子约为 11 …
阅读更多 »细胞转染效率低的原因是什么?
转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质粒DN …
阅读更多 »AAV病毒-细胞外RNAs-TLR3信号通路认知障碍研究 (IF:39.3)
文献标题:Extracellular RNAs-TLR3 signaling contributes to cognitive impairment after chronic neuropathic pain in mice 影响因子:Signal Transduction and Targeted Therapy 是Nature旗下期刊,2023年影响因 …
阅读更多 »siRNA是从牵牛花过表达发现的吗
siRNA(small interfering RNA, 小干扰RNA)并不是从牵牛花的过表达现象中发现的,而是从研究植物基因沉默和RNA干扰现象中逐步发展起来的。siRNA的发现归功于对基因沉默和RNA干扰机制的研究,尤其是科学家在植物、真菌和线虫等生物中对这些现象的观察和研究。 siRNA发现的关键研究 植物基因沉默:在植物中,科学家观察到特定基因可以在 …
阅读更多 »靶向LSD1通过NF2-Hippo-YAP通路抑制黑色素瘤转移
一、文献标题 Targeting lysine-specific demethylase 1 inhibits melanoma metastasis via the Nf2-Hippo-YAP pathway 二、期刊与影响因子 期刊名称:Cell Death & Disease 影响因子:9.6(2023年数据) 出版信息:文章已接收并在线发表, …
阅读更多 »细胞被污染了怎么办?
培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。 若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。 一、细菌和真菌的清除 1、使用抗生素 抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。预防用药比污染后再用药效果好。预防用药一般用双抗生素,污染后清除用药需采用大于常用量5 …
阅读更多 »逆转录病毒可以共感染吗?
可以。逆转录病毒(如MLV、lentivirus等)可以共感染同一细胞,尤其是不同病毒包装不同的转基因载体时,可以实现共转导(co-transduction),从而使同一细胞获得多个基因。 但要注意: 病毒滴度足够高:每个病毒的MOI(Multiplicity of Infection)需要合适,才有可能让同一细胞被两种病毒都感染。 标记或选择机制清晰:常用 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享