组织学

理想的电镜包埋剂(electron microscopic embedding media) 应具有以下性质：黏度低，易透入，聚合均匀，聚合后体积收缩小，能耐受电子轰击，高温下不变形，对细胞成分提取少，精细结构保存良好，在电镜的高倍放大下，不呈现可见结构，有良好的切割性能，有适当的反差，对人体无害等。但实际上，现在所用的各种包埋剂都各有利弊。 包埋剂的种类很 …

免疫组化实验结果的判定和分析，就实验结果而言，免疫组化技术主要涉及抗体实验结果的描述与分析、图片的确定与选取、相关数据的提供。 免疫组化结果的判定原则： ⒈必须同时设对照染色。没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的。 ⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应定位在细胞膜上；CK应定位在细胞浆内；PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内；EMA应定位在细胞膜上等等。 …

组织化学中的组织切片主要有石蜡切片法、冰冻切片法和振动切片法等。石蜡切片法比较节省时间，操作容易，可切极薄的组织片(4 μm 以下，通常为6~10μm 厚的切片），能做连续切片，且组织块可包埋在石蜡中永久保存。但石蜡切片只能用于较小的组织块，不适用于大的组织块。石蜡切片法能改变组织内的化学反应，甚至使可显示的酶和其他物质（如脂类）完全丢失，或使蛋白质变性、酶 …

一、实验原理： 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉 …

免疫共沉淀：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整的细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间结合的保持下来。 免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术，其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)，若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白，就可以形成这样一种复合物：“ …

在病毒包装过程中，如果观察到细胞大量死亡，是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素： 病毒滴度：尽管细胞大量死亡，仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高，可以继续收集病毒用于后续实验。 污染：细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染，收集病毒可能不是一个好主意，因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …

慢病毒感染效率低，尽管用胶体金测试显示滴度很高，可能有以下几个原因： 病毒颗粒质量：虽然胶体金检测显示病毒滴度很高，但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损，无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异：胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量，但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒（感染性单位）可能比实际检测的数量要低 …

冰冻切片法是组织化学，特别是酶组织化学最常用的切片技术，固定或未固定的组织样品均可进行冰冻切片，新鲜组织冰冻切片对组织细胞内酶类保存最佳，尤其对热、酸、碱、有机溶剂等耐受能力弱的酶和化学物质更加适用。冰冻切片也是免疫细胞化学研究中常用的切片方法，能够较完好地保存多种抗原，尤其是表面抗原的抗原性。 在冰冻切片中，组织中水分易形成冰晶，往往影响酶和抗原的定位。一 …

一 、原理： IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A“特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。 二、实验最需要注意点 1 …

1. 包埋剂的配制 (1) 配方Ⅰ : 环氧树脂618 10 ml 十二烷基琥珀酸酐（DDSA) （硬化剂） 5 ml 甲基内次甲基二甲酸酐(nadic methyl anhydride, MNA) （硬化剂） 8 ml 苯二甲酸二丁酯（DBP) （增塑剂） 3 ml 2, 4, 6-三（二甲氨基苯酚） （ DMP-30) （加速剂） 0. 2 ml (2) …