为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …

转染效率受多种因素影响，主要因素有下面几个： 1．转染试剂       不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然，最适合的是高效、低 …

       髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …

羟基氯喹（Hydroxychloroquine，HCQ），氯喹的羟基化类似物，是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂，它抑制溶酶体酸化引起的自噬，并随后阻断自噬体与溶酶体的融合，从而导致自噬体的积累，从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献，以供参考。

我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loading buffer100度充分变性，再分装保存。有些时候比蛋 …

外伤性脊髓损伤（T-SCI）是世界范围内常见的一种损伤，常导致严重的神经功能缺损和渐进性退化。T-SCI的病理是原发性损伤和继发性损伤的结果。原发性损伤指的是直接导致脊髓结构损伤，包括细胞死亡、局部轴索损伤、血管破裂以及损伤部位周围的局灶性出血。继发性损伤是由原发性损伤引起的各种分子、细胞和生化反应引起的损伤。现分享一篇体内转染（Entranster）与大鼠 …

要想做好细胞的电转染实验，应注意以下几点： 1.   选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2.   选择合适的细胞 用于电转的细胞 …

地球上生物的生理活动维持着大约24小时的昼夜节律，这是由核心昼夜节律基因家族调控的。核心昼夜节律钟由许多调节因子组成，如时钟和bmal1，它们形成一个异二聚体，并有助于下游基因的激活。或者，一些调节因子（如per/cry）通过抑制时钟/bmal1活性来调节昼夜节律。这种转录翻译反馈是由核心昼夜节律分子介导的，并产生昼夜节律。现分享一篇体内转染（entrans …

缺血性中风是导致死亡和长期残疾的主要原因。为了克服临床治疗的局限性，迫切需要有前景的神经保护化合物。神经保护剂仅限于单一靶向药物，这进一步限制了其临床疗效。由于大脑特殊的能量需求，以线粒体为中心的能量微环境是缺血性脑卒中复杂病理学研究的新热点。现分享一篇体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究的文献，以供参 …

活化的小胶质细胞介导的神经炎症被认为是蛛网膜下腔出血（SAH）诱发的早期脑损伤（EBI）发病机制中的一个潜在关键因素。骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植的治疗潜力已在多个脑损伤模型中得到证实，并被认为涉及炎症反应的调节。现分享一篇体内转染（entranster）与间充质干细胞减轻蛛网膜下腔出血早期脑损伤研究的文献，以供参考。