英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
- 标题 (Title)
中文: 支链氨基酸靶向miR-203a促进鲤鱼骨骼肌生长
英文: Branched-Chain Amino Acids Target miR-203a/fosb Axis to Promote Skeletal Muscle Growth in Common Carp (Cyprinus carpio)
- 概要 (Summary)
本研究旨在探究支链氨基酸（BCAAs）在缓解饥饿胁迫后对鲤鱼骨骼肌生长的恢复作用及其分子机制。
- 核心发现：研究发现，在饥饿4周后的恢复喂养阶段，饲料中添加 18 g/kg 的复合BCAAs（亮氨酸:异亮氨酸:缬氨酸 = 2:1:1）能最有效地促进鲤鱼体重恢复、增加肌肉粗蛋白含量和肌纤维面积，从而缓解饥饿造成的肌肉损伤。
- 分子机制：BCAAs通过下调 microRNA-203a (miR-203a) 的表达，解除其对 FosB原癌基因（fosb） 的抑制作用。FosB作为AMPK信号通路的下游调控因子，能够促进蛋白质合成（通过AMPK-EEF2K通路）并抑制自噬，最终促进成肌细胞的增殖与分化，改善肌肉质量。
- 结论：BCAAs通过 miR-203a/fosb/AMPK 轴调控鲤鱼骨骼肌的蛋白质重塑和生长发育。
- 采用英格恩产品实验部分 (Experimental Section Using Engreen Products)
在论文的 “2.5. Small Interfering RNA (siRNA) Transfection” 部分明确提到了使用英格恩（Engreen Biosystem）的产品：
“Preliminary experiments involving in vivo siRNA transfection were first performed. The control group received a treatment of 0.65% saline solution, and si-NC, si-fosb-34, si-fosb-680, and si-fosb-1124 were mixed with Entranster-in vivo (Engreen Biosystem, China).”
翻译：首先进行了涉及体内siRNA转染的初步实验。对照组接受0.65%生理盐水溶液处理，而si-NC、si-fosb-34、si-fosb-680和si-fosb-1124则与Entranster-in vivo（英格恩生物公司，中国）混合。
具体应用：
- 产品名称：Entranster™-in vivo（体内RNA转染试剂）。
- 用途：用于将针对 fosb 基因的特异性小干扰RNA（siRNA）以及阴性对照siRNA（si-NC）局部注射转染到鲤鱼的骨骼肌组织中，以实现 fosb 基因的体内敲低（knockdown），从而验证其在BCAAs介导的肌肉生长中的功能。
- 实验意义 (Experimental Significance)
- 理论意义：
- 首次阐明了 BCAAs-miR-203a-fosb-AMPK 这一新的分子调控轴在鱼类骨骼肌生长和能量稳态中的关键作用。
- 揭示了非编码RNA（miR-203a）在营养（BCAAs）调控肌肉发育过程中的桥梁作用，丰富了鱼类营养与分子生物学交叉领域的知识。
- 应用价值：
- 为水产养殖业提供了精准的营养策略。研究确定了 18 g/kg BCAAs (2:1:1) 是促进饥饿后鲤鱼肌肉恢复的最佳剂量和配比，可直接用于优化鲤鱼等淡水鱼的饲料配方。
- 有助于开发 抗肌肉萎缩的功能性饲料添加剂，提高鱼体生长性能和肌肉品质，减少因环境压力（如越冬、运输、繁殖期禁食）造成的经济损失。
- 为利用 小核酸（如siRNA、antagomir）技术 在水产动物中进行基因功能研究和潜在的疾病/生长调控干预提供了成功范例。