2022年 1月 24日, 星期一
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如何使动物体内病毒感染效率提高20-50倍

由于动物体内环境的复杂性,我们在选择动物体内病毒感染试剂时,会区别于细胞实验。通常为避免动物产生过激的免疫反应或者死亡,这类病毒感染试剂纯度会更高些,并且适配体液环境。因此,争对动物体内病毒感染实验,则需要适配特定的动物体内病毒感染增强试剂。

发表在《aging》上的一篇题为“Ubenimex induces autophagy inhibition and EMT suppression to overcome cisplatin resistance in GC cells by perturbing the CD13/EMP3/PI3K/AKT/NF-κB axis”的文章描述到:将LV-pEGFP-N1-CD13 质粒(MOI = 60)溶解在慢病毒增强试剂EnvirusTM-LV(Engreen Biosystem Co, Ltd.)中,并静脉内给药 12 每次治疗前数小时。再过2周,处死小鼠。western blot实验显示,CD13蛋白表达水平显著上调。

同时,发表在《Oncogene》期刊上题目为“Autophagy-dependent generation of Axin2+ cancer stem-like cells promotes hepatocarcinogenesis in liver cirrhosis”文章中表述:将患有异常自噬性肝硬化的大鼠随机编号并静脉注射1×109 TU/ml shRNA 载体、shRNA-Atg3、shRNA-Atg7 和 shRNA-HGF 慢病毒转导增强试剂(Envirus;Engreen Biosystem,北京,中国) 每周两次,持续4周。发现在转基因大鼠肝硬化模型中,通过 Atg3- 和 Atg7-shRNA 的转入,诱导或抑制肝硬化肝脏中的自噬,显著诱导或抑制 HGF 表达,进而增加或减少 EGFP+CD90+ 的产生。揭示了肝细胞通过激活或失活 Met/JNK 和 Met/STAT3 信号,从而促进或防止肝癌发生。

  为避免风险事故发生,病毒感染实验的操作过程通常防护十分严格,能尽快完成实验是实验者的共同期盼。因此,在病毒本身表达效率不高的情况下,推荐使用增强试剂,能帮助提高20-50倍的感染效率,大幅度提高实验成功率,避免二次实验。
参考文献:
1.Autophagy-dependent generation of Axin2+ cancer stem-like cells promotes hepatocarcinogenesis in liver cirrhosis
2. Ubenimex induces autophagy inhibition and EMT suppression to overcome cisplatin resistance in GC cells by perturbing the CD13/EMP3/PI3K/AKT/NF-κB axis

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