大多数实验室使用抗生素,但是如果无菌操作技术掌握得很好,抗生素其实也不是必需的。多数抗生素在37°C 时的半衰期都很短,培养基内实际的抗生素浓度要比你以为的低。
细胞培养所用的抗生素通常以干粉形式保存,使用前用无菌水或其他溶剂将其溶解,得到的抗生素溶液可以不需要再进行过滤除菌。
细胞培养的两种标准抗生素
庆大霉素,储存液浓度5-10 mg/ml, 工作浓度为50 μg/ml 。
青霉素(10 000 单位) /链霉素(10 mg/ml) 的储存液, 工作浓度为100 单位/ml 和100 μg/ml 。把它们分装成1 ml 保存在- 20’C ,工作浓度为每99 ml 培养基加入1 ml 的抗生素贮备液,如果培养基用量比较大,则把抗生素分装为5 ml, 使用时每500 ml 培养基中加入5 ml 抗生素。
常用的抗生素:
抗生素 | 作用对象 | 工作浓度 | 储存液浓度 | 半衰期 | 机制 |
苄青霉素 | 革兰氏阳性菌 | 100单位/ml | 10000单位/ml | 2天 | 抑制细胞壁的合成 |
链霉素 | 革兰氏阴性菌 | 100ug/ml | 10mg/ml | 4天 | 抑制翻译(30S亚基) |
卡那霉素 | 革兰氏阴性菌 | 100ug/ml | 10mg/ml | 抑制翻译(30S亚基) | |
四环素 | 广谱细菌 | 10-50ug/ml | 5mg/ml | 15天 | 抑制翻译(30S亚基) |
庆大霉素 | 广谱细菌、支原体 | 50ug/ml | 5mg/ml | 抑制翻译(30S亚基) | |
林可霉素 | 支原体、革兰氏阳性菌 | 50ug/ml | 5mg/ml | 抑制翻译(50S亚基) | |
泰乐菌素 | 支原体、革兰氏阳性菌 | 10ug/ml | 5mg/ml | 抑制翻译(50S亚基) | |
两性霉菌B | 真菌、酵母 | 2.5ug/ml | 250ug/ml | 4天 | 改变细胞膜通透性 |
制霉菌素 | 真菌、酵母 | 20单位/ml | 2000单位/ml | 改变细胞膜通透性 |