抗体的使用以及储存方式

一、什么是抗体

抗体是一些淋巴细胞直接抵抗外来分子所产生的蛋白质,它们是免疫系统的重要组成成分,是实验室的重要工具。

多克隆抗体是用抗原注射动物产生的,针对相同蛋白质的不同抗原决定簇直接产生的各种不同亲和性的多种免疫球蛋白的混合物。

单克隆抗体是在体外制备的,是免疫淋巴瘤细胞与分泌抗体的浆细胞融合后产生的,整个培养只产生一种抗体(常是IgG) ,直接抵抗外来物。

二、抗体的作用

抗体可以用放射性元素或者酶来标记,可以让它们所识别的蛋白质变成可见的或者是可以定量的。

  • 染色细胞。标记抗体可以用来定位细胞蛋白质。
  • 免疫浏定。抗体可以用来检测抗原是否存在以及其功能。

表一  免疫化学技术、多克隆抗体和单克隆抗体

技术 多克隆抗体 单克隆抗体 共聚单克隆抗体
细胞染色
免疫共沉淀
免疫印迹
免疫亲和纯化
一般好
一般好
一般好
抗体依赖
抗体依赖
抗体依赖
抗体依赖
很好
很好
很好
免疫方法      
标记抗体
标记抗原
困难
一般好

抗体依赖
很好
很好
  • 免疫印迹。就是我们所知道的免疫印迹法,蛋白质是否存在以及数量都可以在滤膜上通过样品的免疫来检测出。
  • 免疫亲和。抗体所针对的蛋白质可以直接被分离和纯化。

三、抗体的贮藏

  • 抗体最好贮藏在-20℃分装,冻融对于大多数抗体都不好。
  • 分装好的抗体可以在4℃保存至少6个月。
  • 加上叠氮钠至终浓度0.02%来阻止细菌的生长。

四、温馨提示

  • 要知道你的抗体是由什么动物产生的,方便后续决定用什么样的二抗。多克隆抗体通常用兔或者猴子,单克隆抗体通常用小鼠、大鼠和仓鼠。
  • 使用前离心去除所有的沉淀,在一些操作中可以阻止高背景。
  • A蛋白,从S. aureus 细胞壁中分离到的42 kDa的多肽;G 蛋白,从β溶血链球菌中分离到的30-35 kDa 的多肽,都与抗体有强烈的结合,它们被用来免疫沉淀或者定位抗体。A蛋自和G蛋白都可以用来与珠子结合或者标记,适用于大部分的抗体亚类。

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