2022年 9月 30日, 星期五
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去除去污剂的可行性

去除去污剂的可行性(根据Harlow 和Lane 1988)

  1. 离子型去污剂
  • 用分子筛G25 柱子进行凝胶过滤,对于一些蛋白质来说,用低于临界微团浓度的另一种去污剂来平衡柱子。
  • 加入8 mol/L 的尿素, 然后把去污剂加到离子交换柱上,让蛋白质在8 mol/L 的尿素中流动,再透析去除尿素。

对于离子型的去污剂,有一个相对较低的微粒大小和较高的临界微团浓度,尽可能地稀释和透析把树脂加到透析液中来增加交换效率。

  1. 非离子型的去污剂
  • 用分子筛G200 柱子进行凝胶过滤,对于一些蛋白质来说,用低于临界微团浓度的另一种去污剂来平衡柱子。
  • 尽可能稀释样品,对DOC透析,然后再慢慢地透析去除DOC 。
  • 使用快速沉降到没有去污剂的庶糖中。

把蛋白质连接到亲和柱或者离子交换柱上,大体积地洗去去污剂,然后洗脱蛋白质。对于一些蛋白质来说,用低于临界微团浓度的另一种去污剂来平衡柱子。

  1. 两性去污剂
  • 尽可能地稀释。
  • 透析。

 

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