去除去污剂的可行性(根据Harlow 和Lane 1988)
- 离子型去污剂
- 用分子筛G25 柱子进行凝胶过滤,对于一些蛋白质来说,用低于临界微团浓度的另一种去污剂来平衡柱子。
- 加入8 mol/L 的尿素, 然后把去污剂加到离子交换柱上,让蛋白质在8 mol/L 的尿素中流动,再透析去除尿素。
对于离子型的去污剂,有一个相对较低的微粒大小和较高的临界微团浓度,尽可能地稀释和透析把树脂加到透析液中来增加交换效率。
- 非离子型的去污剂
- 用分子筛G200 柱子进行凝胶过滤,对于一些蛋白质来说,用低于临界微团浓度的另一种去污剂来平衡柱子。
- 尽可能稀释样品,对DOC透析,然后再慢慢地透析去除DOC 。
- 使用快速沉降到没有去污剂的庶糖中。
把蛋白质连接到亲和柱或者离子交换柱上,大体积地洗去去污剂,然后洗脱蛋白质。对于一些蛋白质来说,用低于临界微团浓度的另一种去污剂来平衡柱子。
- 两性去污剂
- 尽可能地稀释。
- 透析。