使用血清时要注意哪些参数?

血清可以提供细胞生长所必需的生长因子和营养元素,某些细胞特别是转化后的细胞,对于血清的需要量是很低的,在0.5 %左右。有些细胞被“培养成“只生存在低血清浓度的培养基中。由于细胞生长所需的物质已经被完全定性,所以更多的细胞是被培养在添加有特定物质的基础培养基中。如果细胞能够生存在不添加血清的培养基中则是一种比较幸运的情况。

使用血清的时候有一些参数要注意:

  • 血清的浓度   大多数细胞的适宜浓度为5% ~ 20% 。
  • 血清的种类   有些细胞偏爱马的血清,组织细胞养的标准血清为小牛血清,而有些细胞则需要更贵的胎牛血清,还有些细胞(特别是人的)则需要最贵的同种生物血清。
  • 血清是否为热灭活血清   血清的某些成分遇热失活,比如补体。
  • 能从哪里得到血清    由于特定的细胞只能使用特定的血清,使用之前要先向实验室的人员或正在培养细胞的人员询问。虽然不同的公司价格不同,但是血清的选择标准不应该是省钱。

热灭活血清

把冻存的血清在室温条件下融化,如果是500 ml 体积可能要5~6h。融化后的血清在65℃保温30 min 后分装。分装时要根据血清的浓度和培养基所需要的量,分装后要冻存,使用时再把冻存的溶液放入37℃水浴中融解。

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