英格恩技术博客 专注转染等实验

提高病毒感染细胞实验效率的方法

可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。

1.提前一天细胞铺板

提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。

2.感染

⑴将2ul的EnvirusTM-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成EnvirusTM-LV稀释液。4℃静置5分钟。

注:感染悬浮细胞,建议增大EnvirusTM-LV到推荐用量的1-3倍,这样感染效果更好。

⑵将适量病毒原液或稀释液与EnvirusTM-LV稀释液轻柔混匀,4℃静置15分钟。

⑶将上述混合液加入到含完全培养基的细胞上,37℃培养8小时后观察细胞状态,如没有明显变化,不要更换培养基,继续培养24小时后常规更换培养基。由于慢病毒感染较慢,一般在感染96小时后观察结果。

注:适当减少感染时的细胞培养基量可以增加感染效率,但也可能增加细胞毒性。如出现细胞毒性可增加培养基量或更换培养基。

 

 

Check Also

悬浮细胞为什么不容易转染?

   &n …

发表评论

邮箱地址不会被公开。 必填项已用*标注

*