英格恩技术博客 专注转染等实验

ECL发光液常见问题及解答2

4Western Blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很浓怎么办?

对ECL发光来说,可以减少发光时间和显影时间。对英格恩Enlight发光液来说,可以将压过的膜重新用TBST洗涤10min×3次后重新曝光操作。

5Western blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很弱怎么办?

对ECL发光来说,可适当延长曝光时间。如果还是不行,增加蛋白的上样量,增加抗体的用量,同时设立相应的对照,确认实验过程的有效性。

6Western blot化学发光(ECL)时,出现非特异条带怎么办?

非特异条带以边界清晰的条带为标志,区别于边界不清晰的背景。首先,必须明确,如果曝光出现非特异条带,肯定是存在真实的蛋白条带,只是条带不是预期的。对明显的非特异条带,建议深入分析,而不是通过曝光时间等处理隐藏条带。蛋白的降解,上样量,抗体,目的蛋白的修饰等都有可能出现非特异条带。

 

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