一般来说,慢病毒感染时,病毒量的计算主要依据目标MOI(Multiplicity of Infection)以及当前的细胞数量。铺板后24小时的细胞数量可能会有所增加,具体情况取决于细胞的增殖速度。 如果在铺板24小时后进行感染,通常需要考虑细胞的增殖情况来调整病毒量。如果您的细胞在这段时间内大约增殖了一倍,那么可以按铺板时细胞数的两倍来计算所需病毒量,以确 …
阅读更多 »为什么需要替代病毒转染?
在细胞相关的实验操作中,对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞,通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率,以达到目的基因的高效瞬时表达。 病毒转染包括以下步骤:1构建载体 2包装提纯病毒 3感染靶细胞。以慢病毒为例。 慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对 …
阅读更多 »慢病毒浓缩纯化的方法有哪些?
慢病毒纯化工艺,依据其纯化原理主要分为超速离心、密度梯度离心、PEG离心、超滤、切向流、离子交换层析等方法。当前主要的慢病毒纯化均是由上述中的一种或几种方法组合在一起完成。 对于大部分的细胞感染以及普通的动物实验来说,推荐使用超速离心方法对慢病毒进行浓缩。超滤过程中留下的细胞碎片会导致细胞毒性,直接影响病毒的应用。 病毒上清/粗纯病毒 科研级慢病毒 科研 …
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