在过去的几十年中,研究发现,调节性膜内蛋白水解(RIP)在各种细胞过程中起着重要的作用,包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族,包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染(En …
阅读更多 »DNA转染与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121(ZNF121)已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联,以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用,现分享一篇DNA转染(Entranster)与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与线粒体介导的先天性免疫反应研究
宿主细胞的模式识别受体可以检测到微生物感染进而诱导先天免疫反应以激活宿主防御系统对抗入侵微生物,现分享一篇DNA转染(Entranster-H4000)与线粒体介导的先天性免疫反应研究的文献,指出果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)是抗病毒天然免疫反应的负调节因子和抗病毒药物的新靶点。
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些?
1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »质粒DNA细胞转染注意事项
质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »DNA转染(entranster)与基因载体的膜亲和力研究
在基因治疗中,核酸的有效转染依赖于基因载体的作用。这些载体保护核酸免受人体循环系统中核酸酶的降解,并将遗传物质作为治疗疾病的基因药物导入靶细胞。 一个有效的基因载体应该能够压缩目标基因,将其导入所需的宿主细胞,释放遗传物质,并使其与基因组结合。在基因转染过程中,基因载体对细胞膜的亲和力是与其转染效率密切相关的一个关键参数。 现分享一篇DNA转 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究
巨噬细胞(macrophage)活化是宿主防御病原微生物的关键过程,可引起炎症级联反应和炎症介质的释放,如TNF-α、IL-6和NO。反过来这些介质会引起炎症反应以及对邻近组织和巨噬细胞本身产生伤害。现分享一篇DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型,具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童,首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤,起源于间充质(因而是肉瘤)的原始转化细胞,表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染(entranster)与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞,包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞(IPS)。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统,使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程;不同发育阶段的细胞可确定胚胎发育和细胞分化的分子机制 …
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