DNA转染

1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步 …

一般原则： 1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基，以减轻毒性，保证细胞状态。 2.换液是否影响转染效率？ 针对你要拍荧光观察转染效率的情况： 如果只是想观察转染效率，一般建议 不要太早换液，至少等到荧光信号开始显现（通常24–48小时）再拍照。 如果细胞状态不好（明显发黄、漂浮、死亡增加），建议在 4–6小时换液，以保证细胞 …

文献标题 Highly efficient prime editors for mammalian genome editing based on porcine retrovirus reverse transcriptase （基于猪逆转录病毒逆转录酶的高效哺乳动物基因组编辑引物） 影响因子 14.9（Trends in Biotechnology，20 …

     乳腺癌是女性最常见的癌症，也是导致癌症相关死亡的主要原因。上皮-间充质转化（EMT）在肿瘤细胞的转移过程和侵袭能力中起着重要作用。现分享一篇DNA转染（entranster）与鞘磷脂合成酶1调节MDA-MB-231细胞上皮间质转化研究的文献，以供参考。

如果细胞密度较低，一般来说，细胞在转染前的培养时间是很关键的。48小时的培养时间通常是足够的，但是否适合转染还要考虑几个因素： 1. 细胞的生长状态 细胞在转染时最好处于对数生长期，也就是细胞在活跃分裂和增殖中。若细胞密度过低，可能会处于生长迟缓或衰退状态，这会影响转染效率。 细胞密度太低（<30%）：如果细胞太少，可能会影响转染试剂的吸附和细胞的转染 …

1，        质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 2，        质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的 …

       在过去的几十年中，研究发现，调节性膜内蛋白水解（RIP）在各种细胞过程中起着重要的作用，包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族，包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染（En …