质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »湖羊起源、高繁殖力和环境适应性的基因组学研究(备注:填补了很多空白,有意义的文章)
文献标题 Genomic Insights into the Origin, High Fecundity and Environmental Adaptation of Hu Sheep (湖羊起源、高繁殖力和环境适应性的基因组学研究) 发表期刊与影响因子 期刊名称:Advanced Science 影响因子:15.1(根据2025年JCR数据) 一、文献 …
阅读更多 »质粒DNA细胞转染注意事项
质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »DNA转染与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究
脂肪酸氧化(FAO)是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而,脂肪酸氧化(FAO)在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染(Entranster)与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »质粒DNA转染实验效率影响因素
1, 质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 2, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的 …
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »细胞DNA转染效率影响因素
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »调节性T细胞编程促进神经再生
标题 Programming of Regulatory T Cells In Situ for Nerve Regeneration and Long-Term Patency of Vascular Grafts (通过原位编程调节性T细胞促进神经再生与血管移植物的长期通畅性) 影响因子 该研究发表于 Research 期刊,2022年影响因子约为 11 …
阅读更多 »DNA转染与基于de novo设计蛋白DS119的TNFa结合蛋白合理设计研究
蛋白质-蛋白质相互作用的合理设计是创造新型蛋白质药物、诊断探针或调节细胞信号通路的有力工具。SH3和PDZ结构域等小型模块化支架在调节蛋白质相互作用中起着重要作用,因此这些结构域在蛋白质设计中的应用已被广泛研究。De novo蛋白质设计为工程定制蛋白质功能提供模板,为合成生物学研究提供正交蛋白质相互作用网络。已经开发出各种计算方法来引入已知蛋白 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享