英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
进行2个不同基因的siRNA共转染时，确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量，但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量： 当你进行siRNA共转染时，转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说，一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多，因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内，只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »DNA转染与促红细胞生成素在软刺裸鲤适应低氧中的作用研究
促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一种糖蛋白激素，在红细胞生成中起着重要的调节作用，并启动应对环境挑战的细胞稳态反应。青藏高原是缺氧适应的天然实验室。软刺裸鲤（Gymnocypris dobula）是一种高度专业化的高原裂胸鱼，隶属于青藏高原海拔大于4500米的高海拔淡水河和池塘。但EPO在裂腹鱼适应低氧中的作用尚不清楚。现分享一篇DN …
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫，也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性，具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控，表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外，家蚕丝腺特异性转录因子（Tfs）如丝腺因子（SGF，包括SGF-1、SGF- …
阅读更多 »如何得到更高的DNA细胞转染效率？
我认为，要想更高的细胞DNA转染效率，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与线粒体介导的先天性免疫反应研究
宿主细胞的模式识别受体可以检测到微生物感染进而诱导先天免疫反应以激活宿主防御系统对抗入侵微生物，现分享一篇DNA转染（Entranster-H4000）与线粒体介导的先天性免疫反应研究的文献，指出果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）是抗病毒天然免疫反应的负调节因子和抗病毒药物的新靶点。
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000，DNA转染试剂为例，简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞密度在60％左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。 注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与多梳抑制复合物2（PRC2）和肿瘤研究
多梳抑制复合物2（PRC2），可对H3K27三甲基化（H3K27me3），是肿瘤发生发展的一部分，和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染（Entranster）与多梳抑制复合物2（PRC2）和肿瘤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »请问一下，转染带荧光标记的NC，转染后需要拍照看转染效率，在转染后4-6小时换液吗？
一般原则： 1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基，以减轻毒性，保证细胞状态。 2.换液是否影响转染效率？ 针对你要拍荧光观察转染效率的情况： 如果只是想观察转染效率，一般建议 不要太早换液，至少等到荧光信号开始显现（通常24–48小时）再拍照。 如果细胞状态不好（明显发黄、漂浮、死亡增加），建议在 4–6小时换液，以保证细胞 …
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
ＩＬ-３７基因位于人类第二号染色体上，共有五种不同的剪切亚型，即ＩＬ-３７ａ ～ｅ，其中ＩＬ-３７ｂ 是五种亚型中分子量最大的一个 。ＩＬ-３７ 具有广泛的炎症抑制作用，可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ，另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
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