2026年 3 月 16日, 星期一
新闻

蛋白和酶

如何将胶内物质转移到膜上?

凝胶是厚而易碎的基质,这使得操作与温浴都很困难。如果要对胶内的内容物进行杂交,必须将内容物从凝胶引导到硝酸纤维素膜或者尼龙膜上。这一过程称为转移。 转移之后,滤膜与一个探针温浴,观察探针是否能与滤膜上的分子杂交。探针由放射性元素或者其他指示剂标记,所以可以被检测。滤膜与探针的杂交称为印迹。 第一次使用印迹技术是由Southern 描述的, 因此, 这种印迹被 …

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如何进行完美的Western Blot实验

条带清晰就是完美的吗?用图像软件调节明暗,用曝光时间来筛选,这样的结果可靠吗?如果在眼花缭乱的品牌和产品中快速准确地挑选好的实验用品?本视频用简短实用的方法告诉你。 本视频下载链接:https://www.engreen.cn/wp-content/uploads/2020/12/Western-Blot实验.mp4

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荧光表达的细胞在冻存后72小时后再测荧光情况,可以吗?

荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光,但有几点需要注意: 细胞存活率:冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好,具有正常的形态和活力。 荧光稳定性:荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件:使用适当的冻存保护剂(如DMSO)并在-80°C或液氮中冻存,以尽量减 …

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导致western Blot发光(ECL)时胶片上条带弱的原因有哪些?

条带弱的原因可能有以下几个方面: ①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量,也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高的发光底物来调整,如Enlight-plus发光液等。 ②. 蛋白没有充分转移到膜上。转膜后可通过预染Marker判断转膜效率,也可用丽春红染膜、用考马斯亮蓝染胶,判断转膜效率。 ③. 抗体效价 …

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