1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »请问一下,转染带荧光标记的NC,转染后需要拍照看转染效率,在转染后4-6小时换液吗?
一般原则: 1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基,以减轻毒性,保证细胞状态。 2.换液是否影响转染效率? 针对你要拍荧光观察转染效率的情况: 如果只是想观察转染效率,一般建议 不要太早换液,至少等到荧光信号开始显现(通常24–48小时)再拍照。 如果细胞状态不好(明显发黄、漂浮、死亡增加),建议在 4–6小时换液,以保证细胞 …
阅读更多 »湖羊起源、高繁殖力和环境适应性的基因组学研究(备注:填补了很多空白,有意义的文章)
文献标题 Genomic Insights into the Origin, High Fecundity and Environmental Adaptation of Hu Sheep (湖羊起源、高繁殖力和环境适应性的基因组学研究) 发表期刊与影响因子 期刊名称:Advanced Science 影响因子:15.1(根据2025年JCR数据) 一、文献 …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞,包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞(IPS)。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统,使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程;不同发育阶段的细胞可确定胚胎发育和细胞分化的分子机制 …
阅读更多 »细胞DNA转染效率影响因素
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与病理性色素沉着研究
皮肤色素沉着是通过黑色素细胞中黑色素的合成而形?的。黑素细胞是一种上皮细胞,主要位于表皮的基底细胞层,少数黑素细胞位于粘膜。由黑色素组成的色素颗粒可以分布和运输到邻近的角质形成细胞。黑皮质素-1受体(MC1R)的突变是人类皮肤晒黑和色素沉着的关键。现分享一篇DNA转染(Entranster)与病理性色素沉着研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究
多梳抑制复合物2(PRC2),可对H3K27三甲基化(H3K27me3),是肿瘤发生发展的一部分,和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染(Entranster-H4000)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.engre …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与微管稳定性研究
微管介导的细胞事件如细胞内转运和细胞极性的维持高度依赖于微管的稳定性,微管稳定性由细胞中微管相关蛋白(MAPs)的集合控制。MAP7结构域蛋白3(Mdp3)近来被认为是微管稳定性的关键调节因子。然而,如何实现这一功能仍然是不清楚的。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微 …
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