微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰(PTMS),如脱酪氨酸和聚谷氨酰化,特别是在非结构化羧基末端尾(CTTS)中。然而,更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染实验影响因素
1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 还有,尽量选择无 …
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫,也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性,具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控,表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外,家蚕丝腺特异性转录因子(Tfs)如丝腺因子(SGF,包括SGF-1、SGF- …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与镰刀菌细胞毒性研究
在自然界中,微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类,并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为例,这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的,但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议,这实际上是由于对DON毒 …
阅读更多 »如何做好DNA转染实验?
我认为,要想做好质粒DNA细胞转染实验,应注意以下几点: 1, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大,又没有经验,选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些?
1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »DNA转染与免疫毒素CCL25-PE38抗急性T淋巴细胞白血病实验研究
白血病在全球发病率呈上升趋势,我国白血病发病率为十万分之三,每年约新增40 000 例患者。白血病表现为骨髓造血组织恶性增生,形成大量异常的白细胞,广泛浸润组织器官,引起多种组织器官不可逆损害,直接威胁患者生命。白血病的转移、复发与白血病细胞及其生长微环境相互作用密切相关。免疫毒素是一种由抗体或细胞因子与化学毒素耦合组成的融合蛋白。通过受体介导 …
阅读更多 »细胞DNA转染注意事项
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究
动脉粥样硬化(AS)是各种心脑血管疾病的主要病因,发病率和死亡率都很高。氧化应激诱导内皮细胞功能障碍是动脉粥样硬化的病理基础。此外,鞘磷脂和Wnt/β-连环素信号通路被认为与AS密切相关,但具体机制尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与STAT3调控的分子机制研究
信号传导子及转录激活子3(STAT3)是一个介导的各种细胞和生物过程的关键的转录因子,如细胞生长、细胞凋亡、免疫反应和肿瘤。然而,STAT3调控的分子机制仍知之甚少。现分享一篇运用DNA转染(Entranster)与STAT3调控的分子机制研究的文献,以供参考。
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