2026年 3 月 20日, 星期五
新闻

细胞转染

siRNA细胞转染注意事项

为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …

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PBMC细胞可以用电转染吗

PBMC细胞(外周血单个核细胞)可以通过电转染(electroporation)进行基因转染。然而,由于PBMC细胞包括T细胞、B细胞、单核细胞和NK细胞等多种类型,且这些细胞对电转染的敏感性和效率存在差异,电转染PBMC细胞需要特定的优化。 一些关键的注意事项包括: 电转染参数:PBMC电转染的参数(如电压、脉冲时间和次数)需要根据细胞类型进行优化。通常, …

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在共转染中,怎么看质粒的表达能力?通过什么方式呢?

共转染实验中,判断质粒的表达能力通常有几种常见的方式,具体方法取决于你的实验设计和质粒中所包含的标记。以下是几种常用的检测方式: 1. 荧光标记 如果质粒中包含了荧光标记基因(如GFP、RFP等),通过显微镜直接观察荧光信号是最直观的方式。这种方法不仅可以评估质粒的转染效率,还可以间接反映出质粒的表达能力。 优势:快速、简便,能够同时评估转染效率和蛋白表达。 …

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lonza电转,同时电转DNA和RNA,其中RNA的转染效率降低很多,单独RNA,效率很高;共转的时候,RNA的总量是一样的,一个GFP的mRNA,所以可以通过荧光判断表达量,但是当加入DNA后,GFP的荧光就非常差了,用的程序是适用于mRNA的一个程序,有什么建议吗

单独电转mRNA(GFP)信号很好,但一旦同时把DNA一起电转,GFP荧光显著下降。这个往往不是“挤占表达资源”这么简单,更多是由“电转参数 + 细胞先天免疫反应 + 总核酸/盐负载”三方面共同导致。给你一个可操作、优先级排序的排障与优化清单(不需要额外设备就能尝试): 先做两件最快见效的事 把DNA量往下砍 10–100×(起始试 10 ng~100 ng …

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如何能达到较高的细胞转染效率?

1.选择合适的转染试剂       不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的 …

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怎样做好siRNA细胞转染实验

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …

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做好siRNA转染的要点

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …

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siRNA细胞转染常见问题及解答

问:siRNA导入细胞有哪些方法,哪种最好? 答:siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。 问:哪种转染试剂效果好? …

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