2024年 4月 29日, 星期一
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james

蛋白质的长期保存——以冻干固体的形式保存

一种按适当配方制造的冻干蛋白质制剂能够在几年内保持稳定,即使是在室温(Carpenter and Chang 1996) ;然而,冻干配方的最佳溶液组成和工艺条件的研制远远超出了典型学术实验室的能力范围。一个主要的困难是大多数实验室中所用的冻干机通常没有控制样品温度的能力,不能达到低水平的残留水(如低于质量的1%~2%),而低水平的残留水是冻干产品长期保存活 …

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蛋白质的长期保存——以冻结溶液的形式保存

可溶性蛋白质制备物的冷冻是最常用的保存方法之一。将一支装有蛋白质溶液的试管放入机械冰柜中既简单又方便,在低温中,化学降解的速度通常降低,而且如果冷冻本身不引起蛋白质变性,样品应当稳定几周至几个月,特别是将蛋白质样品保存在-80°C 或更低的温度中。然而,冷冻能够引起蛋白质变性,这是因为一些应激而造成的,这些应激包括:低温、溶质的浓度、冰-液体界面的形成和潜在 …

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蛋白质的长期保存——在不冻的水溶液中保存

保存蛋白质最方便的方式是在冰箱中(即4~8℃) 以不冻水溶液的形式保存,对于短期保存或蛋白质特别稳定,这是最有效的方法;然而,必须要认识到即使蛋白质不聚集,也会有渐进的化学降解(特别是氧化)。 在溶液条件(优化了天然状态的热力学稳定性)下,聚集能够被最小化,因为蛋白质总体已脱离了部分折叠、能够聚集的种类(Kim et al. 2000) 。例如,大多数蛋白质 …

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影响实验动物的环境因素有哪些?

1. 温度 常用的实验动物均为恒温动物,具有在一定的温度范围内可保持体温恒定的生理功能,但温度变化幅度过大则影响动物的生长、繁殖,特别对普通级动物,在冬季,温度过低,如果饲养室内仅靠共用锅炉供暧,而不是动物室自供暖气,势必造成饲养室温度过低,动物的繁殖和生长将会停止。夏季温度过高而不采取降温措施,雄性动物将出现睾丸萎缩,精子成活率低;雌性动物出现性周期紊乱, …

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实验动物的微生物控制分级

(一)普通动物 普通动物是指饲养在开放环境中,微生物控制水平低,不携带主要的人畜共患和烈性传染性动物疾病病原体的动物。 普通动物是实验中微生物控制上要求最低的动物,其饲养环境为开放系统,空气未经净化,饲料要求采用符合动物营养要求的全价颗粒饲料,饮水符合城市饮用水标准,并保持在18 -20℃ 、相对湿度在50% -60% 、照度在80 -100lx、噪声低于7 …

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转基因动物和嵌合体动物

所谓转基因动物是指用实验方法导入外源基因在其染色体基因组成稳定整合井能遗传给后代的动物。建立转基因动物的方法有: 显微注射法、反转录病毒感染法与胚胎干细胞法。这三种方法中最常用的是显微注射法。不管选用哪种方法建立转基因动物,其结果都是使动物基因组内包括一个外源性的DNA 片段。这种遗传特征是一般培育方法所不能达到的。 转基因动物是现代分子生物学技术的产物,其 …

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实验动物的遗传学分类——系统杂交动物

1. 系统杂交动物的概念 两个不同的近交系之间杂交所产生的第一代动物称系统杂交动物或F1动物。而两个以上的品系之间的杂交称三元杂交、四元杂交后生的后代统称为杂交群动物。而我们所说的系统杂交动物是指上述的F1代动物,如AKR 和DBA/2 小鼠交配后的第一代动物为AKD2F1 ,在这里, AKR 和DBA/2 称为亲本品系,其中一个为夫系,另一个为母系。它们的 …

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实验动物的遗传学分类——突变系动物

1. 突变系动物的基本概念 具有特殊遗传性状,并由基因符号表示出来的品系,以及基因符号表示虽不明显,但经淘汰和选择后能保持特定遗传性状的品系称为突变系。突变系动物是指正常染色体的基因发生了变异,形成具有各种遗传缺陷的动物。它是通过自然突变和人工定向突变的方法形成的。 2. 突变系动物的应用 (1) 加深人类对哺乳动物遗传机制的认识,以及对生命现象的理解。 ( …

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实验动物的遗传学分类——封闭群动物

1. 封闭群动物的概念 封闭群动物也称远交系动物。20 世纪70 年代日本实验动物研究会规定“五年以上不从外部引种,只在一定的群体中进行繁殖,为经常提供实验动物而进行生产的群体叫做封闭群。” 2. 封闭群动物的特点与应用 (1)特点 ①封闭群动物具有杂合性,避免了近交衰退现象的产生,具有较强的繁殖力和生活力。 ②由于封闭群动物保持5 年以上没有引进新的血缘, …

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实验动物的遗传学分类——近交系动物

目前,按遗传学控制方法,根据基因纯合的程度,把实验动物分类为:近交系、突变系、杂交群、封闭群四类,其规定要求各不相同,而杂种是未经遗传学控制而进行无计划交配繁殖的动物,故不属于本分类范围。 品系的概念 在实验动物中,不同品种的动物,选择其某一生物学特性,经过一定的繁殖方式和培育,使某一特性得到强化,以后可稳定地遗传下来,就成为一个品系。品系是实验动物分类的基 …

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