2024年 5月 17日, 星期五
新闻

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如何解决悬浮细胞转染难题?

    悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。     目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞 …

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如何做好细胞转染实验?

1.选择合适的转染试剂       不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的 …

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体内转染(entranster)与牛磺酸脱氧胆酸减轻早期脑损伤研究

      创伤性脑损伤(TBI)是创伤性死亡和致残的主要原因之一,新的研究表明内质网应激在TBI的病理生理过程中起着重要作用。牛磺脱氧胆酸(TUDCA)是一种亲水性胆汁酸,已被报道为ER应激抑制剂和化学伴侣,并具有抑制细胞凋亡和炎症的潜力。 现分享一篇体内转染(Entranster)与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活 …

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RNA转染(Entranster)与JMJD6和p53及结肠癌发生之间关系研究

umonji域包含6(JMJD6)是JumonjiC结构域蛋白家族的一个成员。相比于其他的家庭成员,JMJD6细胞活性仍不明确,其生物学功能仍然是很大的未开发。现分享一篇文献,文献中我报道JMJD6与肿瘤抑制基因p53相关,文献中用RNA转染(Entranster)研究JMJD6和p53及结肠癌发生之间的关系,以供参考。

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悬浮细胞的siRNA转染操作步骤

悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …

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怎样做好siRNA细胞转染?

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …

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体内转染与细胞死亡因子4/NF-κB和猪心脏功能障碍研究

    冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in vivo)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。

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ECL发光液(enlight)与丙戊酸钠增强肝细胞脂肪变性研究

     丙戊酸钠(Valproate,VPA)是一种广谱抗癫痫药物,已广泛应用于各种抽搐,双极性,或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道,VPA治疗是一个长期的过程,甚至需要终身服药。然而,在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应(ADR),如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙 …

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